Question

如圖一表示某一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列．現(xiàn)有BamHⅠ、MboⅠ2種限制性核酸內(nèi)切酶，切割的堿基序列如圖二所示．請(qǐng)回答下列問題：
（1）圖一質(zhì)粒用BamHⅠ、MboⅠ2種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切后，可以獲得

 

種不同長(zhǎng)度的DNA片段．
（2）目的基因與圖一質(zhì)粒經(jīng)過同種限制酶處理，形成重組質(zhì)粒，選擇的限制酶是

 

．
（3）不含有圖一質(zhì)粒的細(xì)菌在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，在添加青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，存活的細(xì)菌類型是

 

；在添加卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，存活的細(xì)菌類型有

 

．
（4）卡那霉素能抑制植物葉綠體中色素的形成，抗卡那霉素基因是轉(zhuǎn)基因植物中廣泛使用的標(biāo)記基因，其安全性問題可能表現(xiàn)在

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析質(zhì)粒示意圖：質(zhì)粒上含有2個(gè)BamHⅠ酶切割位點(diǎn)，含有1個(gè)MboⅠ酶切割位點(diǎn)，其中BamHⅠ酶也能作用于BamHⅠ酶的切割位點(diǎn)．所以用BamHⅠ、MboⅠ2種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切后，可以獲得3種不同長(zhǎng)度的DNA片段．切割目的基因與質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用MboⅠ酶．

解答： 解：（1）由圖可知，質(zhì)粒上含有2個(gè)BamHⅠ酶切割位點(diǎn)，含有1個(gè)MboⅠ酶切割位點(diǎn)，因此圖一質(zhì)粒用BamHⅠ、MboⅠ2種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切后，可以獲得3種不同長(zhǎng)度的DNA片段．
（2）用BamHⅠ酶切割質(zhì)粒時(shí)，會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒上的青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因，所以應(yīng)用MboⅠ酶切割目的基因與質(zhì)粒，再用DNA連接酶將兩者連接形成重組質(zhì)粒．
（3）因?yàn)橹亟M質(zhì)粒的青霉素抗性基因被破壞，而卡那霉素抗性基因完好，所以導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上生存，但不能在含有青霉素的培養(yǎng)基上生存．在添加青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，存活的細(xì)菌是不含重組質(zhì)粒的；在添加卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，存活的細(xì)菌是含有重組質(zhì)�；蚱胀ㄙ|(zhì)粒的．
（4）卡那霉素能抑制植物葉綠體中色素的形成，抗卡那霉素基因是轉(zhuǎn)基因植物中廣泛使用的標(biāo)記基因，其安全性問題可能表現(xiàn)在食品安全、生物安全、環(huán)境安全．
故答案：（1）3　
（2）MboI
（3）不含重組質(zhì)�！『�有重組質(zhì)�；驁D一質(zhì)粒
（4）食品安全、生物安全、環(huán)境安全

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合質(zhì)粒示意圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)的能力；能分析題圖提取有效信息的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問題作出準(zhǔn)確的判斷和得出正確的判斷的能力．