Question

如圖1所示，若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000對堿基）上相應的E-F區(qū)域 （0.2kb），
（1）那么所形成的重組質粒pZHZ2

 

．
A．既能被E也能被F切開        B．能被E但不能被F切開
C．既不能被E也不能被F切開    D．能被F但不能被E切開

（2）已知在質粒pZHZl中，限制酶G切割位點距限制酶E切割位點0.8kb，限制酶H切割位點距限制酶F切割位點O．5kb．若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質粒pZHZ2樣品，據上表所列酶切結果判斷目的基因的大小為

 

kb；并將目的基因內部的限制酶G和H切割位點標注在圖2中．
（3）若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達產物，則需將重組質粒pZHZ2導入至山羊的

 

細胞中．若pZHZ2進入細胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉基因純合子山羊的方式是

 

．
（4）上述目的基因模板鏈中的．TGA序列對應一個密碼子，翻譯時識別該密碼子的tRNA上相應的堿基序列是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的應用

專題：

分析：據圖1分析，限制酶具有專一性，只能識別特定的DNA序列，并在特定的位點切割磷酸二酯鍵形成DNA片段，獲取目的基因和質粒時切割位點是E和F，重組質粒上含有限制酶E和F的切割位點，所以既能被E也能被F切開．

解答： 解：（1）用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000對堿基）上相應的E-F區(qū)域 （0.2kb），用DNA連接酶連接后形成重組質粒，則在重組質粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位點，形成的重組質粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故A正確．
（2）根據題中信息，原來質粒長度為3.7kb，切去EF（0.2kb）之后還有3.5kb，插入目的基因后形成重組質粒，重組質粒的長度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，進而可推導出目的基因長度為4.7-3.5=1.2kb．重組質粒中G的切割位點距E的切割位點0.8kb，單獨用限制酶G切割后產生1.6kb和3.1kb兩種片段，說明在重組質粒中除了圖中標示出來的G酶切位點外，還有一個G酶切位點；H的酶切位點距F0.5kb，用H單獨酶切后產生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質粒中除了圖中標示出來的H酶切位點外，還有一個H酶切位點；根據題中信息提示“將目的基因內部的限制酶G和H切割位點標注在圖中”，可確定在EF之間分別含有一個G和H的酶切位點，進而可斷定G的識別位點，在距E點右側0.8kb處，H的識別位點在距F左側0.7kb處．
（3）將目的基因導入動物細胞中，通常以受精卵作為受體細胞，當受精卵發(fā)育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達產物．重組質粒插入在一條染色體DNA上，可通過雌雄轉基因山羊雜交的方法來獲取轉基因純合子山羊．
（4）根據堿基互補配對原則，目的基因的模板鏈中堿基為TGA，則mRNA中對應的密碼子為ACU，tRNA中的反密碼子為UGA．
故答案為：
（1）A
（2）1.2    

（3）受精卵  轉基因山羊間相互交配    
（4）UGA

點評：本題綜合考查基因工程的相關內容，涉及到基因工程常用工具酶的切割位點的確定、根據限制酶切割結果推斷目的基因的長度、基因工程中常用的受體細胞、密碼子反密碼子的推導等問題，綜合性強，有一定難度．