Question

如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamH I、Hind III、Sma I直線所示為三種限制酶的酶切位點．據(jù)圖回答：

（1）構(gòu)建基因表達載體時，可用一種或多種限制酶進行切割．為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體應(yīng)選用

 

限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含

 

的培養(yǎng)基上進行．（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調(diào)控序列是

 

（填字母代號）．
A．啟動子     B．tet^R     C．復(fù)制原點    D．a(chǎn)mp^R
（3）過程①可采用的操作方法是

 

（填字母代號）．
A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化    B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化    C．顯微注射    D．細胞融合
（4）對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體．這利用了細胞的

 

性．
（5）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用

 

（填字母代號）技術(shù)．
A．核酸分子雜交     B．基因序列分析     C．抗原-抗體雜交     D．PCR．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：結(jié)合題意分析圖解：圖中質(zhì)粒包括四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動子、復(fù)制原點，以及兩個限制酶切點，并且兩個限制酶切點的位置均在四環(huán)素抗性基因上；目的基因上有三個限制酶切點，與質(zhì)粒對照，共有的是BamH I、Hind III．
圖中①表示目的基因?qū)�入受體細胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)．

解答： 解：（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點，目的基因上也有它們的酶切位點，應(yīng)用此2種酶切．當人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行．
（2）能讓目的基因開始表達的是啟動子，啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達（轉(zhuǎn)錄）的起始時間和表達的程度．
（3）將目的基因?qū)�入到動物中常用顯微注射法．
（4）對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程胚胎移植過程可獲得多個新個體都發(fā)育成了個體，這體現(xiàn)了細胞全能性．
（5）一般檢測目的基因是否表達里用抗原-抗體雜交的方法．
故答案為：
（1）BamHI和HindIII    含氨芐青霉素
（2）A 
（3）C
（4）全能性
（5）C

點評：本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的限制酶的作用特點、啟動子的功能、目的基因?qū)�入動物細胞的方法等相關(guān)知識，要求考生具有一定的識圖能力，并能識記相關(guān)基礎(chǔ)知識．