Question

胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）的研究是當(dāng)前生物技術(shù)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一，尤其是在生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物方面具有極大的科研及應(yīng)用價值．下圖表示利用胚胎干細(xì)胞所作的一系列研究，請據(jù)圖分析回答：
（1）過程Ⅰ將胚胎干細(xì)胞置于γ射線滅活的鼠胎兒成纖維細(xì)胞的滋養(yǎng)層上，并加入

 

、抗生素等物質(zhì)，維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)．在此過程中，滋養(yǎng)層提供干細(xì)胞增殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)，加入抗生素是為了

 

，這對于研究細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理具有重要意義．
（2）過程Ⅱ?qū)�帶有遺傳標(biāo)記的ES細(xì)胞注入早期胚胎的囊胚腔中，通過組織化學(xué)染色，用于研究動物體器官形成的時間、發(fā)育過程以及影響的因素，這項研究利用了胚胎干細(xì)胞具有

 

的特點(diǎn)．在哺乳動物早期發(fā)育過程中，囊胚的后一個階段是

 

．
（3）過程Ⅲ中目的基因?qū)�入胚胎干�?xì)胞最常用的方法是

 

，將目的基因轉(zhuǎn)入胚胎干細(xì)胞前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是

 

．
（4）通過檢測目的基因是否表達(dá)出蛋白質(zhì)產(chǎn)品，可以確定該小鼠體內(nèi)是否成功發(fā)生了基因的同源重組．這種檢測方法是

 

．
（5）胚胎工程的主要技術(shù)有

 

（寫出兩種）．

Answer 1

考點(diǎn)：胚胎干細(xì)胞的來源及分化,基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖解：過程Ⅰ中ES細(xì)胞在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)，飼養(yǎng)層提供干細(xì)胞增殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)．
過程Ⅱ中胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）是由早期胚胎或原始性腺中分離出的一類細(xì)胞，在功能上具有發(fā)育的全能性．
過程Ⅲ將獲得的目的基因?qū)�入胚胎干�?xì)胞之前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用．
過程IV必須去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，其目的是去除胸腺后，不能形成T細(xì)胞，不發(fā)生細(xì)胞免疫，使移植組織細(xì)胞不會被排斥，研究的意義在于解決臨床上供體器官不足或器官移植后免疫排斥等問題．

解答： 解：（1）過程Ⅰ將胚胎干細(xì)胞置于γ射線滅活的鼠胎兒成纖維細(xì)胞的飼養(yǎng)層上，并加入動物血清、抗生素等物質(zhì)，維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)．在此過程中，飼養(yǎng)層提供干細(xì)胞增殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)，加入抗生素是為了防止雜菌污染．
（2）ES細(xì)胞能培養(yǎng)成小鼠個體，說明胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性．在哺乳動物胚胎發(fā)育過程為：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚期→原腸胚→個體，可見，囊胚將進(jìn)一步發(fā)育成原腸胚．
（3）將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞常用顯微注射法．構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以傳給下一代，同時，使目的基因能夠發(fā)揮作用．
（4）檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)產(chǎn)品，通常從轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．
（5）胚胎工程的主要技術(shù)有體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等．
故答案為：
（1）動物血清　防止雜菌污染　
（2）發(fā)育的全能性　原腸胚　
（3）顯微注射法　使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以傳給下一代，同時，使目的基因能夠發(fā)揮作用（4）抗原-抗體雜交　
（5）體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（寫出兩種即可）

點(diǎn)評：本題綜合考查了免疫、基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程等方面的知識，要求考生能夠識記胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)和來源；識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分及作用；識記目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法；明確器官移植發(fā)生的免疫排斥反應(yīng)屬于細(xì)胞免疫．