Question

孔雀石綠（C₂₃H₂₅N₂Cl）常用作紡織業(yè)的染料，也可用作水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的殺菌驅(qū)蟲劑．但它具有高毒性、高殘留的危害，因此對(duì)孔雀石綠廢水的處理已成為環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的熱點(diǎn)．科研人員從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A．主要步驟如圖1所示．

分析并回答：
（1）從①到③的培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液應(yīng)加入

 

作為唯一碳源，此過程的目的是

 

和

 

．
（2）使用

 

法可以在④上獲得單個(gè)菌落．
（3）若要對(duì)獲得的菌株A進(jìn)行分類鑒定，可先利用

 

技術(shù)進(jìn)行體外DNA擴(kuò)增，此過程中采用

 

方法將DNA雙鏈解開，而在菌株A體內(nèi)，DNA復(fù)制時(shí)將雙鏈解開則是在

 

的作用下完成的．
（4）研究人員進(jìn)一步研究了不同金屬離子對(duì)菌株A降解孔雀石綠的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2．
由上述結(jié)果可以看出，與不加金屬離子的對(duì)照組相比，多數(shù)金屬離子對(duì)菌株A降解孔雀石綠有

 

作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對(duì)孔雀石綠有降解作用，則應(yīng)設(shè)置

 

的培養(yǎng)基樣本作為對(duì)照．

Answer 1

考點(diǎn)：培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用,微生物的分離和培養(yǎng),PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用

專題：

分析：培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽．分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基．接種方法：平板劃線法和稀釋涂布法．

解答： 解：（1）根據(jù)題意分析可知，科研人員從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A，所以從①到③的培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液應(yīng)加入孔雀石綠作為唯一碳源，此過程的目的是篩選出菌株A和增加菌株A的濃度（擴(kuò)大培養(yǎng)）． 
（2）使用稀釋涂布平板（或平板劃線）法接種可以在④上獲得單個(gè)菌落．
（3）若要對(duì)獲得的菌株A進(jìn)行分類鑒定，可先利用PCR技術(shù)進(jìn)行體外DNA擴(kuò)增，此過程中采用控制溫度方法將DNA雙鏈解開，即高溫解鏈；而在菌株A體內(nèi)，DNA復(fù)制時(shí)將雙鏈解開則是在解旋酶的作用下完成的．
（4）由圖分析可知，與不加金屬離子的對(duì)照組相比，多數(shù)金屬離子對(duì)菌株A降解孔雀石綠有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對(duì)孔雀石綠有降解作用，則應(yīng)設(shè)置含等量的Pb²⁺但不接種菌株的培養(yǎng)基樣本作為對(duì)照．
故答案為：
（1）孔雀石綠     篩選出菌株A     增加菌株A的濃度（擴(kuò)大培養(yǎng)）
（2）稀釋涂布平板（或平板劃線）
（3）PCR    控制溫度  解旋酶
（4）抑制  含等量的Pb²⁺但不接種菌株A

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查微生物的利用、微生物的分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記微生物分離與純化的方法；識(shí)記PCR技術(shù)的過程和原理，能夠與體內(nèi)DNA復(fù)制進(jìn)行比較；能夠根據(jù)題圖獲得有效解題信息，難度適中．