Question

2．某高校研發(fā)的幽門螺桿菌疫苗為基因工程疫苗，對該菌引發(fā)的胃炎、胃潰瘍等疾病具有較好的預(yù)防效果，其有效成分是一種該菌表面抗原蛋白質(zhì)，請回答下列問題．
（1）根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測出目的基因的脫氧核苷酸序列，進(jìn)行人工合成，然后通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增．
（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)的載體．其中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為轉(zhuǎn)化．在表達(dá)過程中，啟動(dòng)子需與RNA聚合酶識(shí)和結(jié)合，從而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程．最終翻譯是否成功，常用的檢測方法是抗原-抗體雜交．
（4）實(shí)驗(yàn)證明，一定時(shí)間內(nèi)間隔口服該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多，導(dǎo)致獲得的免疫預(yù)防作用更強(qiáng)，持續(xù)時(shí)間更久．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）采用人工合成法獲得目的基因時(shí)，可根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測出目的基因的脫氧核苷酸序列，進(jìn)行人工合成，然后通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增．
（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)的載體．其中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為轉(zhuǎn)化．在表達(dá)過程中，啟動(dòng)子需與RNA聚合酶識(shí)和結(jié)合，從而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程．翻譯的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此檢測翻譯是否成功，常用抗原-抗體雜交法．
（4）實(shí)驗(yàn)證明，一定時(shí)間內(nèi)間隔口服該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多，導(dǎo)致獲得的免疫預(yù)防作用更強(qiáng)，持續(xù)時(shí)間更久．
故答案為：
（1）脫氧核苷酸序列      PCR
（2）構(gòu)建基因表達(dá)的載體      鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來　
（3）轉(zhuǎn)化      RNA 聚合酶         抗原-抗體雜交
（4）記憶

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具、操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．