Question

蘇云金芽孢桿菌能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白．如圖是培育轉(zhuǎn)毒素蛋白基因植物及轉(zhuǎn)基因植物中兩種生物大分子合成的部分過(guò)程示意圖．請(qǐng)據(jù)圖回答問題：
（1）將圖中①處的DNA用HindⅢ、BamH l完全酶切后，反應(yīng)管中有

 

種DNA片段．過(guò)程②需要用到

 

酶．
（2）假設(shè)圖中質(zhì)粒原來(lái)BamHl的識(shí)別序列變?yōu)锽clI的識(shí)別序列，現(xiàn)用BclI和HindⅢ切割質(zhì)粒，再經(jīng)過(guò)程②能否獲得所需重組質(zhì)粒

 

，理由是

 

．
（3）若上述假設(shè)成立，并成功形成重組質(zhì)粒，則重組質(zhì)�？杀幌拗泼�

 

切割．
（4）圖中α鏈?zhǔn)?div id="8ns51gi" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

．不同組織細(xì)胞的相同DNA進(jìn)行過(guò)程③時(shí)啟用的起始點(diǎn)

 

（填“都相同”或“都不同”或“不完全相同”），原因是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、“分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）
（1）來(lái)源：主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的．
（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性．
（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．
2．“分子縫合針”--DNA連接酶
（1）根據(jù)酶的來(lái)源不同分為兩類：E．coliDNA連接酶、T₄DNA連接酶．
這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低．
（2）DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）DNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別：（需理解）
①DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵；
②DNA連接酶是同時(shí)連接雙鏈的切口，而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個(gè)個(gè)脫氧核苷酸連接起來(lái)；
③DNA連接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板

解答： 解：（1）限制酶HindⅢ有2個(gè)切割位點(diǎn)，處理DNA分子時(shí)可獲得3種DNA片段、BamHl有1個(gè)切割位點(diǎn)，再次處理DNA，共獲得4種DNA片段．過(guò)程②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒．
（2）如果質(zhì)粒原來(lái)BamHl的識(shí)別序列變?yōu)锽clI的識(shí)別序列，BclI和BamHl識(shí)別的DNA序列是相同的，切割后露出相同的粘性末端，所以用BclI和HindⅢ切割質(zhì)粒，再經(jīng)過(guò)程②能獲得所需重組質(zhì)粒．
（3）BclI和BamHl識(shí)別的DNA序列是相同的，能切割后露出相同的粘性末端，重組質(zhì)粒可被限制酶HindIII切割．
（4）圖中α鏈?zhǔn)且訢NA的一條鏈為模板合成的mRNA．不同組織細(xì)胞中基因會(huì)進(jìn)行選擇性表達(dá)，因此不同組織細(xì)胞的相同DNA進(jìn)行過(guò)程③時(shí)啟用的起始點(diǎn)不完全相同．
故答案為：
（1）4  DNA連接酶
（2）能  切割后露出的粘性末端相同
（3）HindIII
（4）mRNA  不完全相同     不同組織細(xì)胞中基因會(huì)進(jìn)行選擇性表達(dá)

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程的原理和技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問題的能力和從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力．