Question

【題目】鐮刀型細(xì)胞貧血癥是一種由基因突變引起的遺傳病，患者的紅細(xì)胞是彎曲的鐮刀狀。這樣的紅細(xì)胞容易破裂，使人患溶血性貧血，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致死亡。某科學(xué)興趣小組計(jì)劃從血紅蛋白的成分是否變化來(lái)開(kāi)展研究性學(xué)習(xí)。下列是該小組成員獲得純度很高的血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)過(guò)程，不正確的一項(xiàng)是(　 　)

A. 對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，至少洗滌三次

B. 將血紅蛋白溶液裝入透析袋中透析，可達(dá)到粗分離的目的

C. 在加入蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白后，將混合液靜置一段時(shí)間后分層獲得血紅蛋白溶液

D. 在對(duì)樣品處理時(shí)，需要低速短時(shí)間離心

Answer 1

【答案】C

【解析】

血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，采集的血樣要及時(shí)采用低速短時(shí)間離心分離紅細(xì)胞，然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿，將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯，再加入五倍體積的生理鹽水，緩慢攪拌10min，低速短時(shí)間離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至上清液中沒(méi)有黃色，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。②血紅蛋白的釋放，在蒸餾水和甲苯作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白，加蒸餾水至原血液的體積。加入甲苯的目的是溶解細(xì)胞膜，有利于血紅蛋白的釋放和分離。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為4層。第一層為無(wú)色透明的甲苯層，第2層為白色薄層固體，是脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3層是紅色透明液體，這是血紅蛋白的水溶液，第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過(guò)濾，除去脂溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。②透析，透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)；（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)；（4）純度鑒定：SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。

A. 紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中要加入5倍體積的生理鹽水，重復(fù)洗滌三次，A正確；

B. 將透析袋放入盛有300mL的20mmol/L的磷酸緩沖液中，透析12h，可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)，B正確；

C. 在蒸餾水和甲苯作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白，將攪拌好的混合溶液置于離心管中，以2000r/min的轉(zhuǎn)速離心10min后分層，獲得血紅蛋白溶液，C錯(cuò)誤；

D. 在對(duì)樣品處理時(shí)，采集的血樣要及時(shí)采用低速短時(shí)間離心分離紅細(xì)胞，D正確。