Question

分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)的問題抗體的制備經(jīng)歷了細(xì)胞學(xué)層面和分子學(xué)層面兩個(gè)合成途徑的研究．如圖1是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑模式簡圖．

（1）在獲取抗體之前，需要向健康人體注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重復(fù)注射一次，重復(fù)注射的目的是

 

．免疫學(xué)稱細(xì)胞A為

 

，該細(xì)胞的免疫作用被稱為

 

免疫．
（2）過程①至②獲所取的抗體稱為

 

，其中Y細(xì)胞稱為

 

．
（3）③至⑥流程獲取抗體的技術(shù)稱為

 

技術(shù)．過程⑤需要限制性內(nèi)切酶，還需要

 

酶．V1基因體外擴(kuò)增的技術(shù)一般簡稱為

 

．
用限制酶EcoRV單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對）的長鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRV、Mbol聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到三種長度的DNA片段，見圖2，其中*表示EcoRV限制酶切割的一個(gè)粘性末端．
（4）若Mbol限制酶獨(dú)立切割該普通質(zhì)粒，則可以產(chǎn)生的長度為

 

的DNA片段．
（5）EcoRV限制酶切割普通質(zhì)粒的切割位點(diǎn)如圖3，*為切割點(diǎn)．請?jiān)诖痤}卡的圖上的大致位置上也用箭頭標(biāo)出Mbol限制酶的酶切位點(diǎn)，并標(biāo)示相應(yīng)片段長度．
基因工程中的檢測篩選是一個(gè)重要的步驟．若圖4中箭頭表示大腸桿菌質(zhì)粒的相關(guān)基因與限制酶的酶切位點(diǎn)．圖5示意有關(guān)限制酶在DNA分子中的具體切點(diǎn)．圖6表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法（使在一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法）檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入大腸桿菌．

限制酶	MseI	PstI	EcoRI	SmaI	XmaI
識別序列及切割位點(diǎn)

（6）培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有

 

、

 

．從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是

 

菌落中的細(xì)菌．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過程,基因工程的應(yīng)用

專題：

分析：據(jù)圖1分析，①表示人工合成目的基因；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體受體．
據(jù)圖2分析：該質(zhì)粒共有堿基14kb，在質(zhì)粒上有MboI酶的兩個(gè)切點(diǎn)，有EcoRV酶的一個(gè)切點(diǎn)．
根據(jù)圖4和圖5分析，目的基因?qū)�入的位點(diǎn)是抗青霉素基因，說明抗青霉素基因不能表達(dá)，而抗四環(huán)素基因能表達(dá)，細(xì)菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基能生長，在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長．

解答： 解：（1）向健康人體注射重復(fù)注射特定抗原（如乙肝疫苗，增加抗原數(shù)量，引起顯著免疫反應(yīng)，抗體是由效應(yīng)B細(xì)胞分泌，參與體液免疫．
（2）效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，即能分泌特異性抗體，又能無限繁殖，進(jìn)而產(chǎn)生單克隆抗體．
（3）③至⑥流程屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)，原理是基因工程．過程⑤基因表達(dá)載體的構(gòu)建需要限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶．V1基因體外擴(kuò)增的技術(shù)為（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)），簡稱PCR技術(shù)，原理是DNA復(fù)制．
（4）從題目的已知條件看，該質(zhì)粒共有堿基14kb，在質(zhì)粒上有MboI酶的兩個(gè)切點(diǎn)，有EcoRV酶的一個(gè)切點(diǎn)，再根據(jù)二者共切后的片段分成情況，即可繪制出在質(zhì)粒上兩種酶的切點(diǎn)．
（5）根據(jù)上題切割位點(diǎn)，去除EcoRV酶的一個(gè)切點(diǎn)，則Mbol限制酶獨(dú)立切割普通質(zhì)粒，則可以產(chǎn)生的長度為8KB與6KB的DNA片段．
（6）培養(yǎng)基A中菌落不變，說明培養(yǎng)基中四環(huán)素，使得含有重組質(zhì)粒和非重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞存活，則可能含有目的基因的受體細(xì)菌6個(gè)；培養(yǎng)基B中菌落4個(gè)，則培養(yǎng)基B中含有青霉素，使得重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞不能存活，含有目的基因的是2個(gè)細(xì)菌．
故答案為：（1）、增加抗原數(shù)量，引起顯著免疫反應(yīng)    漿細(xì)胞（效應(yīng)B淋巴細(xì)胞）        體液
（2）、單克隆抗體                雜交瘤細(xì)胞
（3）、轉(zhuǎn)基因技術(shù)      DNA連接酶     PCR技術(shù)    
（4）、8KB與6KB  
（5）
（6）、四環(huán)素   青霉素（青霉素和四環(huán)素）   2和6

點(diǎn)評：本題考查單克隆抗體的制備、基因工程等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生圖文轉(zhuǎn)換能力，理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，能從材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運(yùn)用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識解決相關(guān)的生物學(xué)問題．