Question

[生物--選修3：現(xiàn)代生物科技專題]
科學(xué)家從某無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請(qǐng)回答：
（1）利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、

 

、電激等誘導(dǎo)因素誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合．經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢驗(yàn)，經(jīng)多次篩選以獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞．
（2）有人提出，用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體，請(qǐng)完成設(shè)計(jì)方案：
①取

 

細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的骨髓瘤細(xì)胞中，構(gòu)成重組細(xì)胞．
②將重組細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠

 

內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體．
（3）也有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示．

①在酶A和酶B的作用下組成重組質(zhì)粒．
②圖中I表示目的基因，對(duì)Ⅱ進(jìn)行檢測(cè)與鑒定的目的是

 

，Ⅲ所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過程

專題：

分析：據(jù)圖分析，用酶A（限制酶）處理供體DNA分離出無限增殖調(diào)控基因，用同種限制酶切割質(zhì)粒形成相同的黏性末端，用酶B（DNA連接酶）處理形成重組質(zhì)粒，導(dǎo)入Ⅱ（效應(yīng)B細(xì)胞），形成重組細(xì)胞Ⅲ，特點(diǎn)能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體．

解答： 解：（1）利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等方法誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合．
（2）用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來制備單克隆抗體．
①取特定抗原刺激的B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的骨髓瘤細(xì)胞中，因?yàn)楣撬枇黾?xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中有無限增殖調(diào)控基因（prG），構(gòu)成重組細(xì)胞．
②將重組細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體
（3）分析圖，將無限增殖調(diào)控基因（prG）直接導(dǎo)入B細(xì)胞，能獲得單克隆抗體．
①制備的重組質(zhì)粒中含有的目的基因無限增殖調(diào)控基因．
②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞Ⅱ，即效應(yīng)B細(xì)胞，對(duì)Ⅱ重組細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)與鑒定，目的是檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)；重組細(xì)胞Ⅲ的特點(diǎn)是能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體．
故答案為：
（1）滅活的病毒
（2）①特定抗原刺激的B淋巴細(xì)胞    ②腹腔
（3）②檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)
既能無限增值，又能產(chǎn)生特定抗體

點(diǎn)評(píng)：本題考查單克隆抗體的制備、核移植、基因工程等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記、理解能力，屬于中檔題，解題的關(guān)鍵是獲得重組細(xì)胞，特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．