為了解土壤微生物是否能分解農(nóng)藥，并盡快得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論，有人用“敵草隆”（一種除草劑）進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，取等量砂土分裝于相同的兩容器中，a組高壓滅菌，b組不滅菌，下列有關(guān)事項(xiàng)肯定錯(cuò)誤的是（ ）

A.a組為實(shí)驗(yàn)組，b組為對(duì)照組

B.向a、b中噴入等量敵草隆，再置于同一溫箱中培養(yǎng)相同時(shí)間

C.檢測(cè)敵草隆消失的情況，預(yù)計(jì)a組敵草隆含量不變，b組敵草隆全部分解

D.只用砂土，實(shí)驗(yàn)效果不如幾種典型土壤混合后的好

（2012?唐山三模）由于石油價(jià)格的不斷上漲，替代化石燃料的產(chǎn)品如燃料酒精、生物柴油、沼氣等開發(fā)備受世界關(guān)注，有人想利用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精，其大致流程如圖所示：

（1）玉米秸稈預(yù)處理后，應(yīng)該選用 纖維素 酶進(jìn)行水解，使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖．

（2）分離這種水解酶的野生菌株一般從土壤中篩選，所需要的培養(yǎng)基為 選擇 培養(yǎng)基，但現(xiàn)有野生菌株對(duì)玉米秸稈的轉(zhuǎn)化效率低，某同學(xué)嘗試對(duì)其進(jìn)行改造，以獲得高效菌株．

實(shí)驗(yàn)步驟：

①配置 固體 （固體、半固體、液體）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為 纖維素 ．

②將野生菌株接入已經(jīng) 高壓蒸汽滅菌 法滅菌的培養(yǎng)基平板上．

③立即用適當(dāng)劑量的紫外線照射，其目的是對(duì)野生菌株進(jìn)行 誘變 ．

④菌落形成后，加入 剛果紅 染料，觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大�。�周圍出現(xiàn) 透明圈范圍大 （現(xiàn)象）的菌落即為初選菌落．

⑤分離、純化菌種時(shí)為得到單菌落，常用 平板劃線 和 稀釋涂布平板 接種方法．

（3）發(fā)酵階段需要的菌種是 酵母菌 ，生產(chǎn)酒精必要控制的條件是 無氧（密封、密閉） ．

（4）生產(chǎn)的酒精易揮發(fā)但又可溶于水，宜選用 水蒸氣蒸餾 方法從酵母菌的代謝產(chǎn)物中提�。�

（2013?遼寧二模）[生物﹣﹣選修l生物技術(shù)實(shí)踐]

下列是對(duì)土壤微生物開展探究活動(dòng)的三個(gè)案例，請(qǐng)?jiān)谙鄳?yīng)的空白處作答．

（1）案例l：探究落葉在土壤微生物的作用下是否發(fā)生腐爛（分解）．

設(shè)計(jì)思路：

組別 對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)組

處理

情況 不做處理的帶落葉的土壤 處理過的帶落葉的土壤

將等量的帶落葉的土壤，用帶有編號(hào)的相同的塑料袋分別包扎好，并埋在5cm深的土壤中

對(duì)實(shí)驗(yàn)組土壤應(yīng)該進(jìn)行 滅菌 處理，盡可能排除 土壤微生物 的作用．

（2）案例Ⅱ：探究土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用．

實(shí)驗(yàn)步驟：

①將取自農(nóng)田的土壤制成土壤浸出液，放在燒杯中靜置一段時(shí)間．

②另取兩只燒杯，編號(hào)為A、B，放入等量的淀粉糊．在A燒杯中加入30mL土壤浸出液，B燒杯中加入 30 mL（等量）蒸餾水（無菌水） ．

③在室溫條件下放置7天后，從A燒杯中取20mL溶液，分別加入A1和A2兩支試管各10mL；從B燒杯中取20mL溶液，分別加入B1和B2兩支試管各10mL．

④在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入 （等量的）斐林試劑 ，并進(jìn)行 水浴加熱 處理．

⑤觀察各試管的 顏色變化 ，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果．

（3）案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種在以 纖維素 為惟一碳源的培養(yǎng)基上，并用 剛果紅 （試劑）加以鑒別．

（2014?河南模擬）聚羥基丁酸酯可被用于制造生物可降解塑料．如圖是科研人員用微生物發(fā)酵技術(shù)以蔗糖為原料生產(chǎn)生物可降解塑料的過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）制備篩選堿性天然菌種的培養(yǎng)基的一般步驟是：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、 倒平板 ．培養(yǎng)基中的蔗糖可以為微生物的生長(zhǎng)提供 碳源 ．該培養(yǎng)基除含有微生物所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)注意調(diào)整適宜的 PH ．

（2）為了獲得純凈的培養(yǎng)物，實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)基最好選用 高壓蒸汽滅菌 法進(jìn)行滅菌．

（3）為了檢測(cè)菌液中活菌的數(shù)量是否適宜，可以采用 顯微鏡直接計(jì)數(shù)（稀釋涂布平板法） 法進(jìn)行計(jì)數(shù)，該方法計(jì)數(shù)的結(jié)果與實(shí)際數(shù)目相比 偏大（偏�。� （偏大/偏�。�．

（4）為使微生物易于從發(fā)酵液中分離且達(dá)反復(fù)使用的目的，可采用 固定化細(xì)胞 技術(shù)進(jìn)行處理．該技術(shù)通常采用的方法是 包埋法 ．

（2013?東城區(qū)二模）農(nóng)作物秸稈在生產(chǎn)實(shí)踐中具有多種用途．在特定微生物產(chǎn)生的纖維素酶的催化下，秸稈中的纖維素可被分解為葡萄糖，經(jīng)發(fā)酵后形成乙醇，再加工即可制成燃料乙醇，減少了人類生活對(duì)石油資源的依賴．請(qǐng)分析回答：

（1）欲從土壤中分離獲取上述特定微生物，可采用稀釋涂布法或 平板劃線 法進(jìn)行接種，所用培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源，目的是只允許能產(chǎn)生 纖維素酶 的微生物生長(zhǎng)，而其他微生物均不能生長(zhǎng)．在培養(yǎng)基中加入適量的剛果紅染料，若觀察到 菌落周圍出現(xiàn)透明圈 即可初步篩選到目的菌．

（2）某研究人員經(jīng)上述培養(yǎng)獲得了三種微生物（甲、乙、丙），現(xiàn)通過如下實(shí)驗(yàn)比較三種微生物所產(chǎn)生纖維素酶的活性大小．

①將甲、乙、丙三種微生物經(jīng)離心等方法處理后，制成酶濃度相同的纖維素酶提取液，取等體積的三種提取液分別與等量的纖維素懸浮液混合，在相同且適宜的pH和溫度條件下放置一段時(shí)間．

②利用 斐林 試劑檢測(cè)產(chǎn)物中的葡萄糖，并通過比較顏色深淺程度判斷酶活性的大�。�

③實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

甲提取液 乙提取液 丙提取液

顏色深淺程度 + +++ ++

注：“+”越多，顏色越深

由表分析，三種微生物產(chǎn)生的纖維素酶活性不同，最可能的原因是 不同酶的氨基酸序列不同（或不同酶的空間結(jié)構(gòu)不同） ．其中產(chǎn)生酶活性最強(qiáng)的微生物是 乙 ．

（3）農(nóng)作物秸稈除用于生產(chǎn)燃料乙醇外，還可用于培育蘑菇和生產(chǎn)沼氣等．下圖為某生態(tài)農(nóng)場(chǎng)的部分結(jié)構(gòu)模式圖．

水稻、雜草在此生態(tài)系統(tǒng)的組成成分中屬于 生產(chǎn)者 ．輸入到鴨體內(nèi)的能量除通過呼吸作用以熱能形式散失外，還用于鴨自身的 生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖 等生命活動(dòng)．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，將蘑菇房與蔬菜大棚連通可提高蔬菜產(chǎn)量，增產(chǎn)的原因最可能是 蘑菇產(chǎn)生的CO2為蔬菜光合作用提供原料 ．

（4）對(duì)農(nóng)作物秸稈的充分利用可促進(jìn)生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)在 生物群落與無機(jī)環(huán)境 之間不斷地循環(huán)往返，同時(shí)合理調(diào)整了生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動(dòng)關(guān)系，有效緩解了燃燒秸稈造成的污染和浪費(fèi)．

（2013?石家莊二模）下表是探究落葉在土壤微生物的作用下是否發(fā)生腐爛（分解）的設(shè)計(jì)思路：

組別 對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)組

處理情況 不做處理的帶落葉的土壤 處理過的帶落葉的土壤

將等量的帶落葉的土壤，用帶有編號(hào)的相同塑料袋分別包扎好，并埋在5cm深的土壤中

請(qǐng)回答下列問題：

（1）對(duì)實(shí)驗(yàn)組土壤應(yīng)該進(jìn)行 滅菌 處理，盡可能排除 土壤微生物 的作用．

（2）探究土壤微生物中是否含有分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種在以 纖維素粉 為唯一碳源的培養(yǎng)基上，這樣的培養(yǎng)基屬于 選擇 培養(yǎng)基．

（3）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方式有兩種，即 平板劃線法 和 稀釋涂布平板法 ．并用 剛果紅 （試劑）加以鑒別．當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生 透明圈 來篩選纖維素分解菌．

（2013?黃州區(qū)一模）【生物一選修模塊1：生物技術(shù)實(shí)踐】

請(qǐng)回答下列與生物技術(shù)實(shí)踐相關(guān)的問題：

（1）利用纖維素解決能源問題的關(guān)鍵是高性能纖維素酶的獲�。�科學(xué)家利用培養(yǎng)基從土壤中篩選出能分解纖維素的細(xì)菌，這類細(xì)菌經(jīng)過大量培養(yǎng)后可以從中提取纖維素酶．

①土壤中富含各種微生物，將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上，可得到能分解纖維素的細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)室中獲取純凈菌種常用的接種方法有 平板劃線法 和 稀釋涂布平板法 ．

②雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、 無機(jī)鹽、碳源、氮源

（2）酵母菌是一種真菌，可用于制作果酒．

①果汁發(fā)酵后是否產(chǎn)生酒精，可以用 重鉻酸鉀 來檢驗(yàn)，在酸性條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)特定的顏色．

②酵母菌細(xì)胞固定化可大大提高生產(chǎn)效率．固定酵母菌細(xì)胞時(shí)首先需要將干酵母放入 蒸餾水 中活化；若制得的凝膠珠著色過淺，可能是 海藻酸鈉濃度過低 ．

（3）突變菌往往帶有一些特殊的基因，在獲得這些基因的過程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要．PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸 ．

（4）加酶洗衣粉中有的加香精，高檔洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前從植物中提取芳香油的方法有 萃取法、蒸餾法、壓榨法 等．

（2013?朝陽(yáng)區(qū)一模）從某地分離到能分泌纖維素酶的枯草桿菌，對(duì)此菌進(jìn)行誘變，利用染色法篩選纖維素酶產(chǎn)量高的菌體．（染色法：染料和培養(yǎng)基中的纖維素發(fā)生顏色反應(yīng)，當(dāng)纖維素被菌體水解，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈）

（1）實(shí)驗(yàn)材料：菌體懸液，紫外燈，添加 纖維素 為碳源的選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿等

（2）實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果預(yù)期：

a．將菌體懸液稀釋至適當(dāng)濃度，平均分成甲、乙兩組．

b．甲組用 適當(dāng)劑量（強(qiáng)度） 的紫外燈照射一定時(shí)間，乙組不做處理．

c． 將等量甲乙兩組菌液 接種至選擇培養(yǎng)基上．

d．觀察并測(cè)量 透明圈 的直徑與相應(yīng)菌落直徑

e．若甲組中出現(xiàn)了纖維素酶產(chǎn)量高的酶體，其形成的酶落表現(xiàn)為 透明圈的直徑與相應(yīng)菌落直徑比值 比乙組相應(yīng)值的平均值大．

（3）甲組中會(huì)出現(xiàn)纖維素酶產(chǎn)量不同的酶體，此現(xiàn)象是由于紫外線的照射改變了基因的 結(jié)構(gòu)（或堿基排列順序） ，即發(fā)生了 基因突變 （變異類型），體現(xiàn)了此變異的 不定向 特點(diǎn)．

（4）枯草桿菌因沒有 生物膜 系統(tǒng)，其分泌纖維素酶與真核細(xì)胞蛋白質(zhì)的分泌方式不同．

（5）若用液體培養(yǎng)上述細(xì)菌，研究其數(shù)量變化規(guī)律，繪制出該菌的生長(zhǎng)速率曲線如圖，據(jù)圖描述此菌的種群數(shù)量的變化規(guī)律是 先S型增長(zhǎng)后下降（首先平穩(wěn)隨后增加再平穩(wěn)之后下降） ．

（2012?臨沂二模）【生物一生物技術(shù)實(shí)踐】

廢紙的主要成分是木質(zhì)纖維，科技人員將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源﹣﹣乙醇．下圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程．請(qǐng)回答相關(guān)問題：

（1）①環(huán)節(jié)要選擇的微生物是 纖維素分解酶 ，可將從富含纖維素土壤中獲得的微生物培養(yǎng)在以纖維素為碳源，并加入 剛果紅 的培養(yǎng)基上篩選周圍有 透明圈 的菌落．

（2）將上述篩選出的菌進(jìn)行培養(yǎng)，則②中獲得的酶是 纖維素 酶．該酶至少包括C1酶、Cx酶和 葡萄糖苷酶 三種組分．

（3）③環(huán)節(jié)中被接入的常見菌種是 酵母菌 ，為了確保獲得產(chǎn)物乙醇，④過程要注意避免污染雜菌并要注意 發(fā)酵裝置密閉（保證無氧環(huán)境） ．

（4）生產(chǎn)中為了降低酶的成本首先要通過基因工程等技術(shù)手段對(duì)產(chǎn)酶微生物進(jìn)行改造，提高酶的產(chǎn)量，還可利用 固定化酶 等技術(shù)使酶能夠重復(fù)利用．

飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動(dòng)物吸收利用，還影響對(duì)其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用．若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等．以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖．請(qǐng)分析作答．

（1）培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應(yīng)含有 碳源 、 氮源 、水、無機(jī)鹽等基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)．

（2）為防止雜菌污染，要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進(jìn)行 滅菌 ，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈 倒置 狀態(tài)放置．

（3）接種以前進(jìn)行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成 單個(gè)菌落 ．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的 菌落數(shù) 就能大致推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)．

（4）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A～E五種菌株中， E 是產(chǎn)植酸酶的理想菌株．

（5）獲得目的菌以后，若要用于植酸酶的生產(chǎn)，還需要進(jìn)行 擴(kuò)大培養(yǎng) ．