Question

下列是制備分泌抗X抗原的抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題：
（1）制備單克隆抗體的步驟：
①將注入小鼠體內(nèi)，從小鼠脾臟中獲得淋巴細胞，其中至少1個淋巴細胞帶有抗該抗原的抗體

 

．
②將步驟①獲得的B淋巴細胞與步驟②培養(yǎng)的骨髓瘤細胞可用特有的方法

 

誘導(dǎo)融合．
③將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細胞，放在含

 

培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，篩選．
④這樣獲得的雜交瘤細胞．
⑤檢測和分離帶有抗X抗體的陽性細胞，培養(yǎng)板中每孔放一個細胞進行

 

培養(yǎng)．
⑥將陽性細胞進行

 

培養(yǎng)，從而制備出大量單克隆抗體．
（2）用本法制備出單克隆抗體過程中要用到

 

和

 

技術(shù)．

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程

專題：

分析：單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細胞，將效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．
植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較：

項目	細胞融合原理	細胞融合方法	誘導(dǎo)手段	用途
植物體細胞雜交	細胞膜的流動性，（細胞的全能性）	去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合	離心、電刺激、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)	克服遠緣雜交不親和，獲得雜交植株
動物細胞融合	細胞膜的流動性	使細胞分散后，誘導(dǎo)細胞融合	離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導(dǎo)	制備單克隆抗體的技術(shù)之一

解答： 解：（1）①要獲得能夠產(chǎn)生抗X抗原的抗體的效應(yīng)B細胞，首先將X抗原注入小鼠體內(nèi)，從小鼠脾臟中獲得淋巴細胞，其中至少1個淋巴細胞帶有抗該抗原的抗體．
②植物體細胞雜交過程中原生質(zhì)體融合的方法有物理法、化學(xué)法，而動物細胞融合中有物理法、化學(xué)法和生物法，生物法就是利用滅活的病毒處理，誘導(dǎo)步驟①獲得的B淋巴細胞與步驟②培養(yǎng)的骨髓瘤細胞進行融合．
③將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細胞，如雜交瘤細胞、效應(yīng)B細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞，因此放在含選擇性培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，篩選出雜交瘤細胞．
⑥將篩選出的陽性細胞進行體外培養(yǎng)或體內(nèi)培養(yǎng)，從而制備出大量單克隆抗體．
（2）單克隆抗體制備方法中，需要利用“動物細胞融合技術(shù)”將效應(yīng)B細胞和骨髓瘤細胞融合；融合后的細胞需要經(jīng)過篩選，篩選后需要進行培養(yǎng)，這兩個過程中均利用了“動物細胞培養(yǎng)技術(shù)”．
故答案為：
（1）①X抗原
②滅活的病毒
③選擇性
⑥體內(nèi)培養(yǎng)或體外培養(yǎng)
（2）動物細胞培養(yǎng)   動物細胞融合

點評：本題考查單克隆抗體制備、動物細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力，識圖能力和理解能力，屬于中等難度題．考生要注意識記單克隆抗體制備過程，并且區(qū)分植物體細胞雜交和動物細胞融合過程中誘導(dǎo)融合手段的區(qū)別．