Question

人們發(fā)現(xiàn)小型豬的器官可以用來代替人體的器官進行移植，但是小型豬的器官表面的抗原可以起免疫排斥反應，如圖為科學家將小型豬器官的表面抗原基因（Anti）進行“反向處理”，從而獲得reAnti基因，將其轉(zhuǎn)入豬的成纖維細胞，培育成轉(zhuǎn)基因克隆豬的過程示意圖，其根據(jù)圖回答問題：
（1）過程1中，在獲得目的基因的過程中，PCR技術相當重要，PCR擴增時，需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板結合的

 

、四種脫氧核苷酸和

 

．若使reAnti基因和Anti基因在轉(zhuǎn)基因的克隆豬的同一個細胞內(nèi)表達，應在人工合成的reAnti基因的首段連接上

 

，其作用是能夠被RNA聚合酶識別并結合從而啟動轉(zhuǎn)錄過程．
（2）過程3將重組質(zhì)粒導入到豬胎成纖維細胞后，要通過

 

技術檢測reAnti基因是否已經(jīng)重組到豬胎成纖維細胞的

 

上，從而使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．
（3）從豬胎中取成纖維細胞，用胰蛋白酶處理，然后分散培養(yǎng)，培養(yǎng)時培養(yǎng)瓶應置于含

 

的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)．
（4）器官移植，基因治療也可涉及EK細胞，該細胞來源于

 

或原始性腺．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,動物細胞與組織培養(yǎng)過程,胚胎干細胞的來源及分化

專題：

分析：結合題意分析圖解：圖中①為目的基因的獲取、②為基因表達載體的構建、③為目的基因?qū)�入受體細胞、④將卵母細胞中細胞核移除、⑤為構建重組細胞、⑥為早期胚胎培養(yǎng)、⑦為胚胎移植、⑧為轉(zhuǎn)基因克隆豬的出生．

解答： 解：（1）PCR擴增時，需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板結合的引物、四種脫氧核苷酸和Taq 酶/耐高熱DNA聚合酶．啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達（轉(zhuǎn)錄）的起始時間和表達的程度．因此若使reAnti基因和Anti基因在轉(zhuǎn)基因的克隆豬的同一個細胞內(nèi)表達，應在人工合成的reAnti基因的首段連接上啟動子．
（2）圖中進行了細胞核移植，因此可以確定目的基因?qū)�入到成纖維細胞的細胞核中的染色體上，因此在在檢測目的基因是否導入時，應通過DNA分子雜交技術技術檢測reAnti基因是否已經(jīng)重組到豬胎成纖維細胞的染色體上，從而使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．
（3）在動物細胞培養(yǎng)的過程中，用胰蛋白酶處理，然后分散培養(yǎng)，培養(yǎng)時培養(yǎng)瓶應置于含95%的空氣和5%的CO₂混合氣體的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，其中的二氧化碳可以維持培養(yǎng)液的PH．
（4）胚胎干細胞來源于早期胚胎或原始性腺．
故答案為：
（1）引物    Taq 酶/耐高熱DNA聚合酶    啟動子
（2）DNA分子雜交技術     染色體
（3）95%的空氣和5%的CO₂混合氣體   
（4）早期胚胎

點評：本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，考查了基因工程中的PCR技術、目的基因的檢測、動物細胞培養(yǎng)及胚胎干細胞等方面的知識，要求考生能讀懂圖示流程以及識記相關基礎知識．