Question

紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的．血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂或CO₂．我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白．請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題．
（1）血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：

 

、

 

、

 

和

 

．
（2）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液．
①加入檸檬酸鈉的目的是

 

．
②以上所述的過(guò)程即是樣品處理，它包括

 

、

 

、收集血紅蛋白溶液．
（3）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過(guò)透析，這就是樣品的粗分離．
①透析的目的是

 

；
②透析的原理是

 

．
（4）然后通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定．
①樣品純化的目的是

 

．
②血紅蛋白有什么特點(diǎn)？

 

．
這一特點(diǎn)對(duì)進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：本題是對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的考查，回憶血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟，然后結(jié)合題干信息進(jìn)行解答．

解答： 解：（1）血紅蛋白的提取和分離一般分為4步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
（2）①采取血液時(shí)要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固．
②樣品處理又包括紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析4步．
（3）①透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜蛋白．
②透析的原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)．
（4）①樣品的純化是通過(guò)膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去．
②血紅蛋白呈紅色，在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液，使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作程序．
故答案為：
（1）樣品處理　粗分離　純化　純度鑒定
（2）①防止血液凝固　
②紅細(xì)胞的洗滌　血紅蛋白的釋放
（3）①去除分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)　
②透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)
（4）①通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去
②血紅蛋白呈紅色，在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液，這使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作

點(diǎn)評(píng)：對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理和具體操作方法的掌握是本題考查的重點(diǎn)．