Question

富集培養(yǎng)是從微生物混合群開始，對(duì)特定種的數(shù)量比例不斷增高而引向純培養(yǎng)的一種培養(yǎng)方法．從自然菌樣篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定．聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯（環(huán)境污染物）降解的關(guān)鍵酶，如圖所示用富集方法從土壤中分離聯(lián)苯降解菌的過(guò)程．請(qǐng)分析回答：

（1）①②③過(guò)程目的是

 

．
（2）進(jìn)行⑤過(guò)程的目的是

 

，可采用

 

法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上．在⑤過(guò)程中，首先要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，目的是

 

．
（3）在⑥和⑦的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程中，作為對(duì)照組的是

 

組，設(shè)置實(shí)驗(yàn)組的目是

 

．
（4）若用此方法從土壤中分離自生固氮菌，菌落在平板上培養(yǎng)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)的原因是

 

．配置的培養(yǎng)基中所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有

 

（多選）
A、碳源       B、氮源     C、生長(zhǎng)因子      D、水分      E、無(wú)機(jī)鹽
（5）某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起，請(qǐng)你寫出分離得到純度較高的自生固氮菌和酵母菌的實(shí)驗(yàn)原理

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：（1）微生物培養(yǎng)的程序：a．器具的滅菌、b．培養(yǎng)基的配制、c．培養(yǎng)基的滅菌、倒平板、d．微生物接種、e．恒溫箱中培養(yǎng)、f．菌種的保存；在培養(yǎng)的過(guò)程中一定要注意無(wú)菌操作．
（2）選擇培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基是根據(jù)不同微生物在代謝過(guò)程中所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同而配制的．不同微生物對(duì)某些化學(xué)藥品的抵抗力不同．利用這些特點(diǎn)，我們便可配制出適于某些微生物生長(zhǎng)而抑制其他微生物的選擇培養(yǎng)基，例如從土壤中分離放線菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)；根據(jù)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的特殊的需求，可以選擇不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纖維素分解菌的碳源是纖維素．

解答： 解：（1）①②③過(guò)程目的是通過(guò)富集培養(yǎng)，增大聯(lián)苯降解菌（目的菌）的濃度（比例）．
（2）進(jìn)行⑤過(guò)程的目的是獲得聯(lián)苯降解菌的單個(gè)菌落（進(jìn)一步分離純化目的菌），可采用稀釋涂布法法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上．在⑤過(guò)程中，首先要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，目的是殺滅細(xì)菌和芽孢，防止雜菌干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果．
（3）在⑥和⑦的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程中，⑦作為實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組⑥能夠說(shuō)明獲得的單菌落中沒有其它雜菌．
（4）由于自生固氮菌會(huì)分泌含氮化合物，引起雜菌生長(zhǎng)，因此用此方法從土壤中分離自生固氮菌，菌落在平板上培養(yǎng)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)．由于自身固氮菌能夠固定空氣的氮元素，因此在培養(yǎng)基中不加氮源可以起到選擇作用，但是碳源、生長(zhǎng)因子、水分和無(wú)機(jī)鹽等仍然是必須的成分．
（5）自生固氮菌能在無(wú)氮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，而酵母菌則不能，因此可以用無(wú)氮培養(yǎng)基篩選出自身固氮菌；而青霉素不影響酵母菌等真菌的生長(zhǎng)繁殖，而會(huì)抑制圓褐固氮菌的生長(zhǎng)繁殖，因此在含有青霉素的培養(yǎng)基中可以篩選出酵母菌．
故答案為：
（1）通過(guò)富集培養(yǎng)，增大聯(lián)苯降解菌（目的菌）的濃度（比例）
（2）獲得聯(lián)苯降解菌的單個(gè)菌落（進(jìn)一步分離純化目的菌）   稀釋涂布法  殺滅細(xì)菌和芽孢，防止雜菌干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果
（3）⑦說(shuō)明獲得的單菌落中沒有其它雜菌
（4）自生固氮菌會(huì)分泌含氮化合物，引起雜菌生長(zhǎng)           ACDE
（5）自生固氮菌能在無(wú)氮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長(zhǎng)繁殖，而會(huì)抑制圓褐固氮菌的生長(zhǎng)繁殖

點(diǎn)評(píng)：本題綜合考查了微生物的培養(yǎng)、分離、純化以及富集培養(yǎng)的應(yīng)用，要求考生能夠識(shí)記培養(yǎng)基的成分、常用的滅菌方法及其適用情況；同時(shí)考查了學(xué)生的識(shí)圖能力和分析問題的能力，運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)解決實(shí)際問題的能力．