Question

如圖1表示“華恢1號”抗蟲水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）殺蟲基因通過①～④，最終在宿主細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程叫做

 

．
（2）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造．圖2是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析人工改造質(zhì)粒時(shí)：
①要使抗蟲基因能成功表達(dá)，還應(yīng)插入

 

、

 

．
②用限制酶Ⅰ處理，其目的是：去除質(zhì)粒上的

 

和

 

（基因），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會促進(jìn)細(xì)胞的分裂和生長；
③若用限制酶Ⅱ分別切割經(jīng)過②過程改造的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒．分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長的情況是

 

．
（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為，則該酶識別的核苷酸序列是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、圖1所示，①時(shí)基因表達(dá)載體的構(gòu)建，②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③用農(nóng)桿菌侵染水稻胚細(xì)胞，④植物組織培養(yǎng)．圖2是基因表達(dá)載體，其組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因．標(biāo)記基因可以篩選出含有目的基因的細(xì)胞．
2、“分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的．
（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性．
（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．

解答： 解：（1）殺蟲基因通過①～④，轉(zhuǎn)化是指將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞中，最終在宿主細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程．
（2）①基因表達(dá)載體組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因，要使抗蟲基因能成功表達(dá)，還應(yīng)插入啟動子、終止子．
②tms的編碼產(chǎn)物控制合成吲哚乙酸和tmr的編碼產(chǎn)物控制合成細(xì)胞分裂素．因此用限制酶I處理tms和tmr基因，可以保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會促進(jìn)細(xì)胞的分裂和生長．
③若用限制酶Ⅱ分別切割經(jīng)過②過程，破壞了四環(huán)素抗性基因，受體細(xì)胞不具有抗四環(huán)素功能，但可以抗卡那霉素．分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長．
（3）根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，可以將限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端配對完整，形成DNA鏈為

GACGTC

CTGCAG

，則該酶識別的核苷酸序列是GACGTC．
故答案為：
（1）轉(zhuǎn)化
（2）①啟動子、終止子�、趖ms、tmr
③在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長
（3）GACGTC

點(diǎn)評：本題考查了基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識解決自然界和社會生活中的一些生物學(xué)問題的能力和從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力．