Question

2008年我國某地由于柑橘大實蠅的危害，使橘農(nóng)遭受到了很大的損失，當?shù)卣�府想盡一切辦法幫助橘農(nóng)盡量減少損失．
（1）某橘農(nóng)發(fā)現(xiàn)自家有一株橘樹具有抗蟲性狀，欲利用組織培養(yǎng)技術大量繁殖，該技術應先將離體的柑橘組織或細胞培養(yǎng)一段時間，使其通過

 

分裂方式形成愈傷組織，此過程稱之為

 

，然后繼續(xù)培養(yǎng)，又可以重新長成根或芽等器官，這一過程稱之為

 

．
（2）組織培養(yǎng)的選材非常關鍵，植物材料的選擇直接關系到實驗的成敗．若用花藥進行離體培養(yǎng)，則應選擇花粉發(fā)育至

 

期的花藥培養(yǎng)成功率最高．選擇花粉時，一般要通過

 

來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時需要對花粉的細胞核進行染色，常用的染色劑是

 

．產(chǎn)生花粉植株一般有兩種途徑；一種是花粉通過

 

階段發(fā)育為植株；另一種是花粉在

 

培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再分化成植株．這兩種途徑之間并沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中

 

．
（3）影響植物組織培養(yǎng)的因素很多，其中最關鍵的激素有

 

和

 

．
（4）無菌技術也是成功誘導出花粉植株的重要因素，請說明下列各項需要消毒，還是需要滅菌？
①培養(yǎng)基，②培養(yǎng)皿，③接種環(huán)，④花蕾，⑤實驗操作者的雙手，⑥三角錐形瓶．

 

（填編號）需要滅菌，

 

（填編號）需要消毒．

Answer 1

考點：植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：本題主要考查植物組織培養(yǎng)的知識．
植物組織培養(yǎng)是指利用特定的培養(yǎng)將離體的植物細胞、組織或器官培養(yǎng)成完整植株的過程，所以花藥的離體培養(yǎng)、基因工程中的受體細胞的培養(yǎng)、植物體細胞雜交后雜種細胞的培養(yǎng)以及植物的大量快速繁殖都要用到植物組織培養(yǎng)技術．植物組織培養(yǎng)的過程是外植體

脫分化

愈傷組織

再分化

根、芽→試管苗．脫毒植物苗的取材一般是幼嫩的芽或莖，主要是這些部位不帶病毒．植物組織培養(yǎng)過程中，生長素和細胞分裂素同時使用時，兩者用量的比例影響著細胞的發(fā)育方向（或分化）．培養(yǎng)中必須具備植物激素、無機物（礦質元素）、有機物等營養(yǎng)物質．愈傷組織的特點是細胞排列疏松而無規(guī)則、呈無定形狀態(tài)．

解答： 解：（1）植物組織培養(yǎng)中細胞發(fā)生的是有絲分裂，細胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，經(jīng)再分化形成完整個體．
（2）單核期花粉對離體刺激敏感，選用該期花粉可提高培養(yǎng)的成功率，選擇花粉時可用顯微鏡觀察、篩選；對花粉細胞核染色應該選擇堿性染料，常用醋酸洋紅．產(chǎn)生花粉植株一般有兩種途徑；一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株；另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再分化成植株．細胞培養(yǎng)成植株的兩條途徑取決于植物激素的種類及比例，尤其是生長素和細胞分裂素．
（3）影響植物組織培養(yǎng)的因素很多，其中最關鍵的激素有生長素和細胞分裂素．在培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的用量比值不同，誘導生根發(fā)芽結果不同，當比值低時，有利于發(fā)芽，比值高時，有利于生根．
（4）滅菌對象為培養(yǎng)基和實驗器材，消毒對象為要保持活性的材料和實驗者自身．
故答案為：
（1）有絲        脫分化       再分化
（2）單核        鏡檢（顯微鏡觀察）       醋酸洋紅       胚狀體       誘導      激素的種類及其濃度配比
（3）生長素      細胞分裂素
（4）①②③⑥④⑤

點評：本題主要考查學生對植物組織培養(yǎng)相關知識的記憶和理解能力．在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料．植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂也分化．消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌．