Question

對(duì)番茄的研究中發(fā)現(xiàn)，害蟲損傷番茄葉片后，葉上的細(xì)胞壁能釋放出一種類激素因子，這種物質(zhì)能通過(guò)細(xì)胞組織擴(kuò)散到莖和其他葉片上，啟動(dòng)蛋白酶抑制劑的基因后，開始高效合  成蛋白酶抑制劑，并在莖葉中迅速積累，以對(duì)付害蟲的再次侵襲．蛋白酶抑制劑對(duì)害蟲的消化酶有抑制作用，因此害蟲取食后，就會(huì)因無(wú)法消化食物而被殺死．
人們嘗試著將番茄的蛋白酶抑制劑基因?qū)�入玉米，讓玉米獲得與番茄相似的抗蟲性狀，以對(duì)付異常猖獗的玉米螟（一種玉米害蟲）．試分析回答下列問(wèn)題：
（1）若檢測(cè)轉(zhuǎn)入的蛋白酶抑制劑基因是否轉(zhuǎn)入，應(yīng)采用

 

法進(jìn)行檢測(cè)；若檢測(cè)蛋白酶抑制劑基因是否表達(dá)，應(yīng)采用

 

技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)．
（2）將番茄的蛋白酶抑制基因轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞時(shí)，最常采用的方法是

 

，除此之外還有

 

和

 

等．
（3）重組DNA的建構(gòu)需要的工具酶有

 

．
（4）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，除了要在重組DNA中插入目的基因外，還需要有啟動(dòng)子、終止子以及

 

．
（5）若要培養(yǎng)無(wú)病毒玉米植株，可取玉米的

 

進(jìn)行快速繁殖．在培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了要加入所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還要加入

 

和

 

兩種激素．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因．
目的基因分子水平上的檢測(cè)：
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)

解答： 解：（1）若檢測(cè)轉(zhuǎn)入的蛋白酶抑制劑基因是否轉(zhuǎn)入，應(yīng)采用DNA分子雜交法進(jìn)行檢測(cè)；若檢測(cè)蛋白酶抑制劑基因是否表達(dá)，應(yīng)采用抗原--抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)．
（2）將番茄的蛋白酶抑制基因轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞時(shí)，最常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此之外還有基因槍法和花粉管通道法等．
（3）重組DNA的建構(gòu)需要同種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，然后運(yùn)用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒形成重組質(zhì)粒．
（4）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，除了要在重組DNA中插入目的基因外，還需要有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因．
（5）一般植物的莖尖和根尖分生組織不含病毒，因此若要培養(yǎng)無(wú)病毒玉米植株，可取玉米的莖尖（或分生組織）進(jìn)行快速繁殖．在培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了要加入所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還要加入生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素兩種激素．
故答案為：
（1）DNA分子雜交抗原--抗體雜交
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法
（3）限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶 
（4）標(biāo)記基因
（5）莖尖（或分生組織）    生長(zhǎng)素    細(xì)胞分裂素

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠基因工程目的基因檢測(cè)與鑒定的方法；識(shí)記目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法；識(shí)記基因表達(dá)載體的構(gòu)成；識(shí)記培育無(wú)病毒植物的實(shí)驗(yàn)材料和培養(yǎng)基成分等知識(shí)，難度不大，屬于考綱中識(shí)記層次的考查．