Question

2．人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提�。�但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重．如果應(yīng)用基因工程和克隆技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能．其大致過程如下：
Ⅰ．采集良種供體奶牛的卵母細(xì)胞和精液，通過體外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．將人血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵，形成重組細(xì)胞；
Ⅲ．電脈沖刺激重組細(xì)胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．將胚胎移植到受體母牛的子宮中，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛．
請回答下列問題：
（1）一般情況下，良種奶牛所產(chǎn)生的能用于體外受精的卵母細(xì)胞往往數(shù)量不足，請舉出一種可以獲得更多卵母細(xì)胞的方法：①用促性腺激素處理良種母牛（使其超數(shù)排卵）；②從屠宰場已屠宰母牛的卵巢中采集、培養(yǎng)．
（2）步驟I中，在體外受精前，需要對奶牛的精子進(jìn)行獲能處理．受精時(shí)，往往一個(gè)卵母細(xì)胞只能和一個(gè)精子結(jié)合，受精過程中防止多精入卵的生理反應(yīng)包括透明帶反應(yīng)
和卵黃膜的封閉作用．
（3）步驟II中，將人的血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵最為有效的方法是顯微注射技術(shù)．導(dǎo)入基因前，需要將血清白蛋白基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，這一步驟屬于基因工程“四步曲”中的核心步驟，其中將血清白蛋白基因與調(diào)控組件結(jié)合時(shí)必須用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（4）實(shí)驗(yàn)步驟III中，進(jìn)行動(dòng)物早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有水、無機(jī)鹽、有機(jī)鹽類、維生素、激素、氨基酸核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加動(dòng)物血清．
（5）實(shí)驗(yàn)步驟IV中，應(yīng)選擇性別為雌性的奶牛胚胎進(jìn)行移植．請舉出一種人工控制或篩選胚胎性別的方法：①X精子與Y精子分離技術(shù)（選擇X型精子進(jìn)行體外受精）；②顯微鏡鏡檢法（利用顯微鏡觀察胚胎細(xì)胞性染色體確定胚胎性別）；③SRY-PCR胚胎的性別鑒定技術(shù)[利用SRY基因（Y染色體上的性別決定基因）作為探針，對胚胎細(xì)胞的DNA進(jìn)行檢測]．
（6）若需迅速得到大量轉(zhuǎn)基因奶牛，現(xiàn)有兩種處理方法：
方法A：在步驟IV中將早期胚胎分離成若干個(gè)胚胎細(xì)胞，讓其分別發(fā)育成一頭小牛．進(jìn)行上述操作時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育至桑椹胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行操作，分割時(shí)必須注意要將早期胚胎中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割．
方法B：在步驟IV中將早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞核移植到普通黃牛的去核卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成新胚胎．為獲得大量可供移植的胚胎細(xì)胞核，可將早期胚胎細(xì)胞分離出來，在添加了抑制因子的培養(yǎng)液中，將其培養(yǎng)成能夠增殖而不發(fā)生分化的胚胎干細(xì)胞，再從該細(xì)胞中提取所需的細(xì)胞核．上述兩種方法中，最能保持步驟IV中早期胚胎細(xì)胞遺傳特征的是方法A．

Answer 1

分析 1、體外受精過程包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精，其中卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)的方法：（1）主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精．（2）第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞；
（3）第三種方法：是直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞，叫活體采卵．
2、受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始．

解答 解：（1）一般情況下，良種奶牛所產(chǎn)生的能用于體外受精的卵母細(xì)胞往往數(shù)量不足，可以獲得更多卵母細(xì)胞的方法有：①用促性腺激素處理良種母牛（使其超數(shù)排卵）；②從屠宰場已屠宰母牛的卵巢中采集、培養(yǎng)．
（2）步驟I中，在體外受精前，需要對奶牛的精子進(jìn)行獲能處理．受精時(shí)，往往一個(gè)卵母細(xì)胞只能和一個(gè)精子結(jié)合，受精過程中防止多精入卵的生理反應(yīng)包括透明帶反應(yīng)和卵黃膜的封閉作用．
（3）步驟II中，將人的血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵最為有效的方法是顯微注射技術(shù)．導(dǎo)入基因前，需要將血清白蛋白基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，這一步驟屬于基因工程“四步曲”中的核心步驟，其中將血清白蛋白基因與調(diào)控組件結(jié)合時(shí)必須用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（4）實(shí)驗(yàn)步驟III中，進(jìn)行動(dòng)物早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有水、無機(jī)鹽、有機(jī)鹽類、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加動(dòng)物血清．
（5）實(shí)驗(yàn)步驟IV中，應(yīng)選擇性別為雌性的奶牛胚胎進(jìn)行移植．人工控制或篩選胚胎性別的方法有：①X精子與Y精子分離技術(shù)（選擇X型精子進(jìn)行體外受精）；②顯微鏡鏡檢法（利用顯微鏡觀察胚胎細(xì)胞性染色體確定胚胎性別）；③SRY-PCR胚胎的性別鑒定技術(shù)[利用SRY基因（Y染色體上的性別決定基因）作為探針，對胚胎細(xì)胞的DNA進(jìn)行檢測．
（6）若需迅速得到大量轉(zhuǎn)基因奶牛，現(xiàn)有兩種處理方法：
方法A：在步驟IV中將早期胚胎分離成若干個(gè)胚胎細(xì)胞，讓其分別發(fā)育成一頭小牛．進(jìn)行上述操作時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育至桑椹胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行操作，分割時(shí)必須注意要將早期胚胎中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割．
方法B：在步驟IV中將早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞核移植到普通黃牛的去核卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成新胚胎．為獲得大量可供移植的胚胎細(xì)胞核，可將早期胚胎細(xì)胞分離出來，在添加了抑制因子的培養(yǎng)液中，將其培養(yǎng)成能夠增殖而不發(fā)生分化的胚胎干細(xì)胞，再從該細(xì)胞中提取所需的細(xì)胞核．上述兩種方法中，最能保持步驟IV中早期胚胎細(xì)胞遺傳特征的是方法A．
故答案為：
（1）①用促性腺激素處理良種母牛（使其超數(shù)排卵）；②從屠宰場已屠宰母牛的卵巢中采集、培養(yǎng)
（2）獲能    透明帶    卵黃膜的封閉
（3）顯微注射技術(shù)   核心步驟     DNA連接
（4）激素   氨基酸
（5）雌性
①X精子與Y精子分離技術(shù)（選擇X型精子進(jìn)行體外受精）；②顯微鏡鏡檢法（利用顯微鏡觀察胚胎細(xì)胞性染色體確定胚胎性別）；③SRY-PCR胚胎的性別鑒定技術(shù)[利用SRY基因（Y染色體上的性別決定基因）作為探針，對胚胎細(xì)胞的DNA進(jìn)行檢測]
（6）桑椹胚或囊胚    內(nèi)細(xì)胞團(tuán)  　去核卵母  　胚胎干 　　A

點(diǎn)評 本題考查體外受精、受精過程、基因工程等知識(shí)，要求考生識(shí)記體外受精技術(shù)的過程及方法；識(shí)記受精作用的過程；識(shí)記基因工程的操作步驟及應(yīng)用，能聯(lián)系實(shí)際答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．