下面是將乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過程及有關(guān)資料，請(qǐng)分析回答下列問題．
資料1：巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營(yíng)養(yǎng)型酵母菌，能將甲醇作為其唯一碳源，此時(shí)AOX1基因受到誘導(dǎo)而表達(dá)，圖中質(zhì)粒上5′AOX1和3′AOXI（TT）分別是基因AOX1的啟動(dòng)子和終止子．
資料2：巴斯德畢赤酵母菌體內(nèi)無天然質(zhì)粒，所以科學(xué)家改造出了圖1所示的pPIC9K質(zhì)粒用作運(yùn)載體，其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組，將目的基因整合于染色體中以實(shí)現(xiàn)表達(dá)．

資料3：限制酶切位點(diǎn)
限制酶 識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)
SnaBⅠ
AcrⅡ
SacⅠ
BalⅡ
（1）如果要將HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒重組，應(yīng)該在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置接上
 
、
 
限制酶識(shí)別序列，這樣設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是
 
．
（2）酶切獲取基因后，需用
 
將其連接到pPIC9K質(zhì)粒上，形成重組質(zhì)粒，并將其導(dǎo)入大腸桿菌中，以獲取
 
．
（3）步驟3中應(yīng)選用限制酶
 
來切割重組質(zhì)粒獲得重組DNA，然后將其導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌細(xì)胞．
（4）為了確認(rèn)巴斯德畢赤酵母菌轉(zhuǎn)化是否成功，在培養(yǎng)基中應(yīng)該加入卡拉霉素以便篩選，轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞中是否含有HBsAg基因，可以用
 
法進(jìn)行檢測(cè)．
（5）轉(zhuǎn)化的酵母菌在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，需要向其中加入
 
以維持其生活，同時(shí)誘導(dǎo)HBsAg基因表達(dá)．
（6）與大腸桿菌等細(xì)菌相比，用巴斯德畢赤酵母菌細(xì)胞作為基因工程的受體細(xì)胞，其優(yōu)點(diǎn)是蛋白質(zhì)合成后，細(xì)胞可以對(duì)其進(jìn)行
 
并分泌到細(xì)胞外，便于提取．
考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用
專題：
分析：根據(jù)重組質(zhì)粒上的目的基因若要表達(dá)，需要目的基因的首尾含有啟動(dòng)子和終止子分析（1）．根據(jù)DNA連接酶的功能，基因過程的操作過程分析（2）．根據(jù)重組質(zhì)粒上的目的基因若要表達(dá)，需要目的基因的首尾含有啟動(dòng)子和終止子分析（3）．根據(jù)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)是否導(dǎo)入目的基因分析（4）．根據(jù)資料1顯示，甲醇為該酵母菌的唯一碳源，同時(shí)誘導(dǎo)HBsAg基因表達(dá)分析（5）．根據(jù)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在細(xì)胞器種類上的區(qū)別，及細(xì)胞器的功能分析（6）．
解答： 解：
（1）重組質(zhì)粒上的目的基因若要表達(dá)，需要目的基因的首尾含有啟動(dòng)子和終止子．而SnaBⅠ、AvrⅡ識(shí)別的序列在啟動(dòng)子與終止子之間，只要在目的基因兩側(cè)A和B位置分別接上這兩種序列，并用SnaBⅠ、AvrⅡ這兩種內(nèi)切酶對(duì)質(zhì)粒和目的基因同時(shí)切割，便會(huì)各自出現(xiàn)相同的粘性末端，便于重組與表達(dá)，同時(shí)防止自身環(huán)化，因此在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的識(shí)別序列． （2）①用DNA連接酶將切割后的HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒；②導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)，目的是利用大腸桿菌無性繁殖速度，短時(shí)間內(nèi)可獲取大量的重組質(zhì)粒．
（3）重組DNA的兩側(cè)分別是啟動(dòng)子和終止子，除BglⅡ外，其它限制酶會(huì)破壞含有啟動(dòng)子、終止子的目的基因．
（4）用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)是否導(dǎo)入目的基因．
（5）資料1顯示，甲醇為該酵母菌的唯一碳源，同時(shí)誘導(dǎo)HBsAg基因表達(dá)．
（6）酵母菌為真核生物，細(xì)胞內(nèi)具有對(duì)分泌蛋白加工的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器，細(xì)菌等原核生物，不具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器．
故答案為：
（1）SnaBⅠAvrⅡ避免質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化（或任意連接）
（2）DNA連接酶　大量重組質(zhì)粒
（3）BglⅡ
（4）DNA分子雜交
（5）甲醇
（6）加工（修飾）
點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程應(yīng)用的關(guān)知識(shí)，考查了學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解和掌握情況，對(duì)圖表的分析判斷能力．培養(yǎng)學(xué)生搜集和處理科學(xué)信息的能力，思維能力，分析和解決問題的能力，具有一定的難度．
練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

下列關(guān)于甘油三酯代謝的敘述，錯(cuò)誤的是（　�。�
A、外源性甘油三酯由乳糜微粒主要運(yùn)送到脂肪組織
B、脂肪組織中部分甘油三酯分解為脂肪酸和甘油轉(zhuǎn)運(yùn)入肝臟和其他組織細(xì)胞
C、肝臟中脂肪酸和甘油重新合成甘油三酯由低密度脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)至血液
D、在寒冷饑餓時(shí)，脂肪組織中甘油三酯分解并轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟沁\(yùn)送到各組織細(xì)胞供能

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科目：高中生物 來源： 題型：

如圖是抑制劑降低酶活性的兩個(gè)作用機(jī)理模型，研究發(fā)現(xiàn)精氨酸能降低NAGase酶的催化效率，判斷精氨酸降低NAGase酶活性機(jī)理的實(shí)驗(yàn)方案和結(jié)論是（　�。�
A、不斷提高精氨酸濃度，如果反應(yīng)速率不能提高，則屬于模型A
B、不斷提高精氨酸濃度，如果反應(yīng)速率不能提高，則屬于模型B
C、不斷提高底物濃度，如果反應(yīng)速率能提高，則屬于模型A
D、不斷提高底物濃度，如果反應(yīng)速率能提高，則屬于模型B

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科目：高中生物 來源： 題型：

根據(jù)有關(guān)微生物的知識(shí)，分析回答問題．

（1）當(dāng)水體過于純凈時(shí)，硝化細(xì)菌會(huì)形成休眠體，這種休眠體被稱為
 
．
（2）對(duì)于混有硝化細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌和大腸桿菌的懸浮液，可利用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行微生物篩選．篩選硝化細(xì)菌的培養(yǎng)基成份包括
 
（供選：葡萄糖、纖維素、牛肉膏、（NH4）2SO4、KNO3、無機(jī)鹽、瓊脂、伊紅-美藍(lán)染料、H2O），制備培養(yǎng)基時(shí)，滅菌與調(diào)pH值的先后順序是
 
．
（3）如利用上述培養(yǎng)基篩選大腸桿菌菌落，則應(yīng)另外添加的成份是
 
，菌落特征為
 
．
（4）將采自養(yǎng)殖池中的水樣1ml稀釋100倍，然后吸取稀釋后的水樣1ml，接種于上述硝化細(xì)菌選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)，接種所使用的工具是
 
．一段時(shí)間后觀察菌落并計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次結(jié)果如右圖．該養(yǎng)殖池每毫升水含有硝化細(xì)菌
 
個(gè)．

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科目：高中生物 來源： 題型：

神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)內(nèi)分泌功能的調(diào)節(jié)有甲、乙、丙三種方式，如圖所示．據(jù)圖分析回答：
（1）甲、乙、丙中表示下丘腦對(duì)內(nèi)分泌腺分級(jí)調(diào)節(jié)模式的是
 
．
（2）若激素甲是甲狀腺激素，促進(jìn)其分泌的激素有
 
，它的分泌還有反饋調(diào)節(jié)，反饋調(diào)節(jié)的靶腺為
 
．激素能“定向”作用于相應(yīng)的靶器官（組織），主要機(jī)制在于
 
．
（3）抗利尿激素的合成和分泌是通過圖中模式
 
，它由
 
合成，作用的靶器官及其部位是
 
．
 
可刺激該激素分泌量增加．它的調(diào)節(jié)意義在于
 
．
（4）血糖升高，可以直接刺激胰島B細(xì)胞，使胰島素分泌增加；也可通過圖中模式
 
進(jìn)行調(diào)節(jié)，使胰島素分泌增加．如果胰島素分泌不足，細(xì)胞攝取葡萄糖、氨基酸等
 
（增加/減少）；甘油三酯等物質(zhì)分解
 
（增加/減少）．

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科目：高中生物 來源： 題型：

圖乙表示圖甲所示池塘受污染后在人為干預(yù)下恢復(fù)過程的能量流動(dòng)圖（單位為103kJ/m2?y），請(qǐng)回答：
（1）該池塘的不同水層分布著不同的生物，屬于群落的結(jié)構(gòu)，影響該結(jié)構(gòu)的主要環(huán)境因素是
 
．
（2）輸入該生態(tài)系統(tǒng)的能量主要是
 
，第一營(yíng)養(yǎng)級(jí)到第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量傳遞效率為
 
（保留一位小數(shù)）．
（3）圖乙中A表示，圖中未利用的能量在生物體內(nèi)的存在形式是
 
．
（4）消費(fèi)者需要補(bǔ)償能量輸入的主要原因是
 
．
（5）該池塘被輕微污染后，通過自身的
 
，很快恢復(fù)到接近原來的狀態(tài)．隨著時(shí)間的推移，池塘內(nèi)物種的數(shù)目即
 
不斷提高．

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科目：高中生物 來源： 題型：

回答下列有關(guān)細(xì)胞和細(xì)胞分裂的問題．
圖1甲是某種動(dòng)物體細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)示意圖，乙是該動(dòng)物產(chǎn)生的一個(gè)卵細(xì)胞示意圖，丙、丁為植物的某個(gè)葉肉細(xì)胞中的兩種膜結(jié)構(gòu)以及發(fā)生的生化反應(yīng)．請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）圖1甲中結(jié)構(gòu)①的主要功能是保護(hù)細(xì)胞和
 
．
（2）甲圖中具有膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器有
 
（填序號(hào)）．將該細(xì)胞置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的葡萄糖溶液（與該細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)液滲透壓相等）中，一段時(shí)間細(xì)胞也會(huì)脹破，其原因可能是
 
．
（3）若甲是人的大腿肌細(xì)胞，在進(jìn)行長(zhǎng)跑時(shí)，大腿肌肉會(huì)感到酸痛，這是由于葡萄糖在細(xì)胞的
 
（填序號(hào)）中進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的結(jié)果．
（4）甲圖與丙丁所在的細(xì)胞相比，結(jié)構(gòu)上的區(qū)別表現(xiàn)在
 
．
（5）影響丙、丁兩種膜上生化反應(yīng)的最主要環(huán)境因素分別是
 
和
 

（6）如果乙是甲細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂形成的，則該生物的一個(gè)體細(xì)胞中最多時(shí)含有的染色體數(shù)是
 
；參與由甲形成乙過程的非膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器有[]
 
和[]
 
．
（7）根據(jù)乙圖在圖2方框中繪出形成該細(xì)胞的次級(jí)卵母細(xì)胞（中期）的示意圖，并注明染色體上的基因（不考慮染色體互換）．

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科目：高中生物 來源： 題型：

圖表示二倍體生物細(xì)胞分裂過程中染色體、染色單體和DNA分子之間的關(guān)系，表示減數(shù)分裂第一次分裂后期的是（　�。�
A、
B、
C、
D、

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科目：高中生物 來源： 題型：

回答下列有關(guān)生物進(jìn)化和生物多樣性的問題．
圖中的小圓圈表示物種，箭頭表示物種的變異，箭頭線上有兩條短線的代表被淘汰的變異個(gè)體．箭頭線上無短線的代表未被淘汰的變異個(gè)體．
（1）用達(dá)爾文自然選擇學(xué)說對(duì)圖1進(jìn)行解釋，具體可表述為
 
．達(dá)爾文的進(jìn)化論正確地解釋了生物
 
現(xiàn)象的起源．
資料顯示，在果蠅中，每個(gè)基因的突變率約為10-5，現(xiàn)有一個(gè)個(gè)體數(shù)為108的種群．
（2）若該種群的每一代出現(xiàn)基因突變數(shù)是2×107個(gè)，則每個(gè)果蠅的基因數(shù)
 
對(duì)．果蠅的某一對(duì)相對(duì)性狀由等位基因（N、n）控制，其中一個(gè)基因在純合時(shí)能使合子致死（注：NN、XnXn、XNY等均視為純合子）．有人用一對(duì)果蠅雜交，得F1代果蠅共185只，其中雄果蠅63只，F(xiàn)1代雌果蠅共有兩種表現(xiàn)型，讓F1代果蠅隨機(jī)交配，理論上F2代成活個(gè)體構(gòu)成的種群中基因N的頻率為
 
．
植物的抗逆性是指植物在不利的環(huán)境條件下出現(xiàn)的如抗寒、抗凍、抗鹽、抗病蟲等的抗逆性狀．
（3）在不利的環(huán)境條件下，許多植物表現(xiàn)出一些抗逆性，這說明突變的有害和有利并不是絕對(duì)的，它取決于
 
．植物的抗逆性基因來源于
 
．一種植物出現(xiàn)的優(yōu)良抗逆性狀，在自然狀態(tài)下很難轉(zhuǎn)移到其他種類的植物體內(nèi)，主要是因?yàn)榇嬖?div id="4s4yomy" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 
．
（4）請(qǐng)用現(xiàn)代生物進(jìn)化理論分析基因工程育種不同于傳統(tǒng)雜交育種技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)？
 
．

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