Question

14．小鼠是繼果蠅之后的又一種模式動(dòng)物，圖1表示生產(chǎn)長(zhǎng)效胰島素轉(zhuǎn)基因小鼠培育過(guò)程示意圖，圖2表示圖1中③表達(dá)載體構(gòu)建過(guò)程圖示．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）圖1中的過(guò)程①注射A物質(zhì)的目的是使供體母鼠超數(shù)排卵，若進(jìn)行體外受精，則需將未成熟的卵子培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具備受精能力．
（2）在圖2中，當(dāng)目的基因的DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應(yīng)管中有4種DNA片段，經(jīng)過(guò)程⑧形成的重組質(zhì)粒上將有HindⅢ（或1種）限制酶的切點(diǎn)．
（3）為確保目的基因在小鼠細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，圖2的⑧過(guò)程在構(gòu)建基因的表達(dá)載體時(shí)，需將目的基因插在啟動(dòng)子、終止子兩種片段之間，將表達(dá)載體送入細(xì)胞時(shí)，圖1中的過(guò)程④常用的方法是顯微注射．
（4）為檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，通常采用的方法是抗原-抗體雜交．

Answer 1

分析 分析圖1：圖示為某轉(zhuǎn)基因小鼠培育過(guò)程示意圖，其中①表示注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵；②表示同期發(fā)情處理；③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；④表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；⑤表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程；⑥表示篩選；⑦表示胚胎移植過(guò)程．
分析圖2：圖2表示圖1中③表達(dá)載體構(gòu)建過(guò)程圖示．

解答 解：（1）過(guò)程①注射的激素是促性腺激素，目的是促進(jìn)良種母畜超數(shù)排卵；體外受精時(shí)，要將未成熟的卵子培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具備受精能力．
（2）在圖2中，目的基因的DNA含有1個(gè)HindⅢ切割位點(diǎn)，2個(gè)BamhⅠ切割位點(diǎn)，因此該目的基因DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應(yīng)管中有4種DNA片段；目的基因是用限制酶HindⅢ、BamhⅠ切割獲得的，而質(zhì)粒是用限制酶HindⅢ、BclⅠ切割的，由于BamhⅠ和BclⅠ切割形成的黏性末端相同，因此目的基因和質(zhì)粒可經(jīng)DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒，但重組質(zhì)粒上有HindⅢ（或1種）的切點(diǎn)，沒(méi)有BamhⅠ和BclⅠ切點(diǎn)．
（3）為確保目的基因在小鼠細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，圖2的⑧過(guò)程在構(gòu)建基因的表達(dá)載體時(shí)，需將目的基因插在啟動(dòng)子、終止子兩種片段之間；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）為檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，通常采用抗原-抗體雜交法．
故答案為：
（1）超數(shù)排卵    減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）
（2）4     HindⅢ（或1種）
（3）啟動(dòng)子、終止子    顯微注射
（4）抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合某轉(zhuǎn)基因小鼠培育過(guò)程示意圖，考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及具體步驟，掌握各步驟中注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題；識(shí)記胚胎移植的基本程序，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．