Question

2．運(yùn)用動(dòng)物體細(xì)胞雜交技術(shù)可實(shí)現(xiàn)基因定位．研究發(fā)現(xiàn)：用人體細(xì)胞與小鼠體細(xì)胞進(jìn)行雜交得到的雜種細(xì)胞含有雙方的染色體．雜種細(xì)胞在持續(xù)分裂過程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失，只剩一條或幾條．如圖是人的缺乏HGPRT酶突變細(xì)胞株（HGPRT^-）和小鼠的缺乏TK酶細(xì)胞株（TK^-）融合后并在HAT培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程，結(jié)果表明最終人的染色體在融合細(xì)胞中僅存有3號(hào)染色體或17號(hào)染色體或兩者都有．已知只有同時(shí)具有HGPRT酶和TK酶的融合細(xì)胞才可在HAT培養(yǎng)液中長(zhǎng)期存活與繁殖．
（1）體細(xì)胞雜交克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和（或生殖隔離），過程 ①常使用的方法是滅活的病毒．細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是融合成一個(gè)核．
（2）過程 ②中，為了防止細(xì)菌的污染，所用培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的抗生素，此外還要定期用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理細(xì)胞，使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液．
（3）從實(shí)驗(yàn)中所起的作用可以判斷HAT培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基．
（4）從圖示結(jié)果看，可以確定人的基因TK 酶位于17號(hào)染色體；該方法是否可以對(duì)鼠基因定位，為什么？不能，因?yàn)殡s種細(xì)胞中保留了鼠的全部遺傳物質(zhì)．

Answer 1

分析 根據(jù)題意可以看出，該技術(shù)可以對(duì)人的TK酶基因進(jìn)行定位．該技術(shù)中利用了細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件有：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清等天然物質(zhì)；（3）適宜的溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂．

解答 解：（1）由于不同種生物有性雜交時(shí)存在生殖隔離，所以通過體細(xì)胞雜交能克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，促進(jìn)原生質(zhì)體融合的方法是用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)．細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是兩個(gè)細(xì)胞的核融合成一個(gè)核．
（2）為了防止細(xì)菌的污染培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的抗生素，還要定期用胰蛋白酶處理細(xì)胞，防止接觸抑制，從而使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液．
（3）根據(jù)題意可知，“只有同時(shí)具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合細(xì)胞才可在 HAT 培養(yǎng)液中長(zhǎng)期存活與繁殖”，因此HAT 培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起選擇（篩選）作用．
（4）從培養(yǎng)結(jié)果可以看出，培養(yǎng)獲得的細(xì)胞中均具有鼠的全部染色體，但是只有含人的17號(hào)染色體的細(xì)胞存活下來，由此可得，人的TK酶基因位于17號(hào)染色體．由于鼠的染色體沒有缺失，因此不可以對(duì)鼠的基因進(jìn)行定位．
故答案為：
（1）遠(yuǎn)緣雜交不親和（或生殖隔離）     滅活的病毒     融合成一個(gè)核 
（2）抗生素      胰蛋白酶（膠原蛋白酶） 
（3）選擇
（4）不能，因?yàn)殡s種細(xì)胞中保留了鼠的全部遺傳物質(zhì)

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)以及基因定位的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力、圖文轉(zhuǎn)換能力和理解能力，難度適中，只要記住相關(guān)知識(shí)點(diǎn)即可得出正確答案．