Question

某實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：用人的體細(xì)胞與小鼠體細(xì)胞進(jìn)行雜交得到的雜種細(xì)胞含有雙方的染色體．雜種細(xì)胞在持續(xù)分裂過程中僅保留小鼠的染色體而人的染色體會(huì)逐漸丟失，最后只剩一條或幾條．如圖示意人的缺乏HGPRT酶的突變細(xì)胞株（HGPRT^-）和小鼠缺乏TK酶的細(xì)胞株（TK^-）融合并在HAT培養(yǎng)液中培養(yǎng)的簡(jiǎn)要過程．實(shí)驗(yàn)顯示，人的染色體在融合細(xì)胞中僅存3號(hào)或17號(hào)染色體或兩者都有．已知只有同時(shí)具有HGPRT酶和TK酶的融合細(xì)胞才可在HAT培養(yǎng)液中長(zhǎng)期存活與繁殖．

（I）體細(xì)胞雜交克服了

 

．的障礙，過程①可用到的不同于植物細(xì)胞融合的方法是

 

，細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有

 

的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)．
（2）過程②中，為防止細(xì)菌污染，應(yīng)向培養(yǎng)液中添加一定量的

 

；此外，還要定期用

 

等處理細(xì)胞，使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液．
（3）從培養(yǎng)過程看，HAT培養(yǎng)液不僅能提供營(yíng)養(yǎng)，還可起到

 

作用．
（4）分析圖示結(jié)果，可確定人的

 

基因位于

 

號(hào)染色體上．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞工程的常用技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：根據(jù)題意可以看出，該技術(shù)可以對(duì)人的TK酶基因進(jìn)行定位．該技術(shù)中利用了細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件有：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清等天然物質(zhì)；（3）適宜的溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂．

解答： 解：（1）體細(xì)胞雜交打破了生殖隔離，克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，動(dòng)物細(xì)胞融合的方法中常用的生物法為滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)，體現(xiàn)細(xì)胞膜具有流動(dòng)性．
（2）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為了防止細(xì)菌的污染，培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的抗生素．由于動(dòng)物細(xì)胞具有接觸抑制的現(xiàn)象，因此要定期用胰蛋白酶處理細(xì)胞，使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液．
（3）根據(jù)題意可知，“只有同時(shí)具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合細(xì)胞才可在 HAT 培養(yǎng)液中長(zhǎng)期存活與繁殖”，因此HAT 培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起選擇（篩選）作用．
（4）從培養(yǎng)結(jié)果可以看出，培養(yǎng)獲得的細(xì)胞中均具有鼠的全部染色體，但是只有含人的17號(hào)染色體的細(xì)胞存活下來，由此可得，人的TK酶基因位于17號(hào)染色體．
故答案為：
（ l ）遠(yuǎn)緣雜交不親和（或生殖隔離） 用滅活的（仙臺(tái)/動(dòng)物）病毒誘導(dǎo)融合    流動(dòng)性
（ 2 ）抗生素   胰蛋白酶
（ 3 ）選擇（篩選）
（ 4 ） TK酶  17

點(diǎn)評(píng)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)以及基因定位的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力、圖文轉(zhuǎn)換能力和理解能力，難度適中，只要記住相關(guān)知識(shí)點(diǎn)即可得出正確答案．