Question

19．圖為利用生物技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因豬和轉(zhuǎn)基因煙草的過(guò)程（圖中數(shù)字表示過(guò)程或技術(shù)，字母表示物質(zhì)或結(jié)構(gòu)），據(jù)圖回答：

（1）為分離提純蘇云金芽孢桿菌，先用LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，再用劃線(xiàn)分離（涂布分離）方法進(jìn)行分離，獲得一個(gè)個(gè)單獨(dú)的菌落．
（2）在研究過(guò)程中，采用PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，然后將目的基因與質(zhì)粒等載體結(jié)合形成了重組質(zhì)粒．在重組質(zhì)粒的構(gòu)建過(guò)程中需要的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（3）圖中②代表胚胎體外培養(yǎng) 技術(shù)．若培養(yǎng)C中的ES細(xì)胞，一般在培養(yǎng)皿底部制備一層 胚胎成纖維細(xì)胞，目的是促進(jìn)生長(zhǎng)抑制分化．
（4）若在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液環(huán)境下用特定的酶處理D，可獲得原生質(zhì)體．若將含有D的培養(yǎng)物放在搖床上，通過(guò)液體懸浮 培養(yǎng)可以分散成單細(xì)胞，這些單細(xì)胞具有胚性 細(xì)胞的特征．
（5）使用自然生長(zhǎng)的煙草莖進(jìn)行組織培養(yǎng)，需要依次在70%酒精和5%次氯酸鈉溶液中浸泡消毒．各種器皿和培養(yǎng)基等通常用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（6）從經(jīng)特定免疫處理的豬中提取B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞 融合，形成雜交細(xì)胞，經(jīng)篩選，克隆培養(yǎng)后，獲得的單一細(xì)胞的特征是既能產(chǎn)生特異抗體，又能無(wú)限增殖．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程，其中①表示獲取目的基因的過(guò)程，則A為目的基因，B為重組DNA分子；②表示早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)；③表示胚胎移植；④⑤表示植物組織培養(yǎng)過(guò)程，D表示愈傷組織，E表示胚狀體．

解答 解：（1）蘇云金芽孢桿菌可用LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；分離微生物常用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法，這樣可以獲得一個(gè)個(gè)單獨(dú)的菌落．
（2）PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用同種限制酶切割運(yùn)載體和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒．
（3）圖中②代表胚胎體外培養(yǎng)技術(shù)．若培養(yǎng)C中的ES細(xì)胞，一般在培養(yǎng)皿底部制備一層胚胎成纖維細(xì)胞，目的是促進(jìn)生長(zhǎng)抑制分化．
（4）若在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液環(huán)境下用特定的酶（纖維素酶和果膠酶）處理D，可獲得原生質(zhì)體．若將含有D的培養(yǎng)物放在搖床上，通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成單細(xì)胞，這些單細(xì)胞具有胚性細(xì)胞的特征．
（5）使用自然生長(zhǎng)的煙草莖進(jìn)行組織培養(yǎng)，需要依次在70%酒精和5%次氯酸鈉溶液中浸泡消毒．各種器皿和培養(yǎng)基等通常用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（6）制備單克隆抗體時(shí)，將漿細(xì)胞與骨髓瘤融合，經(jīng)篩選，克隆培養(yǎng)后，獲得既能產(chǎn)生特異抗體，又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞．
故答案為：
（1）LB液體     劃線(xiàn)分離（涂布分離）   菌落
（2）PCR （聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）   限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
（3）胚胎體外培養(yǎng)技術(shù)促進(jìn)生長(zhǎng)抑制分化
（4）甘露醇    液體懸浮   胚性
（5）5%次氯酸鈉     高壓蒸汽滅菌
（6）骨髓瘤細(xì)胞    既能產(chǎn)生特異抗體，又能無(wú)限增殖

點(diǎn)評(píng) 本圖結(jié)合圖解，綜合考查基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程及微生物的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記相關(guān)工程技術(shù)的原理、操作步驟及應(yīng)用；識(shí)記無(wú)菌技術(shù)，掌握分離微生物的兩種方法，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．