Question

【題目】現(xiàn)已知細菌的抑藻方式有直接抑藻（細菌與藻細胞直接接觸）和間接抑藻（細菌分泌胞外抑藻物質(zhì)）兩種方式。研究人員從養(yǎng)殖場新鮮養(yǎng)殖廢水中篩選出了一株對某有害水華藻具高效抑藻能力的菌株，大致過程如下：制備養(yǎng)殖廢水稀釋液→接種于固體培養(yǎng)基→細菌純化培養(yǎng)→發(fā)酵液抑藻實驗→篩選菌株�；卮鹣铝袉栴}。

（1）培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是_______（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaC1”）。為避免由于微生物繁殖導(dǎo)致培養(yǎng)基_______而不適宜使用，配制好的培養(yǎng)基要立即進行_______滅菌。

（2）制備不同濃度的養(yǎng)殖廢水稀釋液時每次都要更換無菌移液管，原因是_______。

（3）為探究該菌株的抑藻方式，將適量去除菌體的發(fā)酵液（甲組）、含菌體的發(fā)酵液（乙組）和無菌培養(yǎng)基（丙組）分別加入到有害水華藻液中，適宜條件培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計有害水華藻的數(shù)量。若結(jié)果是_______，表明該菌株能進行間接抑藻。

（4）對該菌株的胞外物質(zhì)進行透析，在截留分子量分別為1000 Da、500 Da和100 Da（Da表示單位）的透析袋（作用與半透膜相似）透析后，發(fā)現(xiàn)袋內(nèi)物質(zhì)抑藻能力分別是無、有和有。這表明提取出來的抑藻物質(zhì)的分子量范圍最可能是_______。

Answer 1

【答案】蛋白胨 污染 高壓蒸汽 使用過的移液管中的殘留液會影響實驗結(jié)果 甲、乙兩組水華藻細胞的數(shù)量均明顯低于丙組 500 Da～1000 Da

【解析】

1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2、培養(yǎng)基滅菌常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，使用對象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等。

3、本實驗屬于典型的對照實驗，其中自變量為細菌是否產(chǎn)生抑藻物質(zhì)，因變量是水華藻的數(shù)量。對照組為空白對照，加入的是無菌培養(yǎng)基；實驗組是用含有菌株的發(fā)酵液，其他影響實驗的變量（如水華藻數(shù)量、生長條件等）為無關(guān)變量，在對照實驗中，無關(guān)變量必須保持相同。

4、由半透膜制作的透析袋，具有選擇透過性，允許水分子及其它一些溶劑分子和小分子通過，而一些大分子物質(zhì)不能通過。

（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是蛋白胨。獲得純凈的培養(yǎng)基是研究和應(yīng)用微生物的前提，為避免由于微生物繁殖導(dǎo)致培養(yǎng)基污染，操作者需用酒精擦拭雙手消毒，對金屬用具、玻璃器血、培養(yǎng)基等要進行滅菌，其中，培養(yǎng)基只能用高壓蒸汽滅菌。

（2）制備不同濃度的養(yǎng)殖廢水稀釋液時需要使用移液管。洗凈后的移液管內(nèi)壁應(yīng)不掛水珠。移取溶液前，應(yīng)先用濾紙將移液管末端內(nèi)外的水吸干，每次使用時需更換無菌移液管，原因是使用過的移液管中的殘留液會改變所移取溶液的濃度，影響實驗結(jié)果。

（3）為探究該菌株的抑藻方式，自變量是抑藻物質(zhì)，因變量是水華藻細胞數(shù)量。其中甲、乙兩組加入的是含菌體的發(fā)酵液與水華藻細胞，為間接抑藻（細菌分泌胞外抑藻物質(zhì)）；丙組加入的是無菌培養(yǎng)基與水華藻細胞，為空白對照。若該菌株能進行間接抑藻，則甲、乙兩組水華藻細胞的數(shù)量均明顯低于丙組。

（4）從題干信息可知，用截留分子量為1000 Da的透析袋對該菌株的胞外物質(zhì)進行透析后，袋內(nèi)物質(zhì)無抑藻能力，說明菌株胞外物質(zhì)可以透過截留分子量為1000 Da的透析袋；用500 Da和100 Da的透析袋對該菌株的胞外物質(zhì)進行透析后，袋內(nèi)物質(zhì)有抑藻能力，說明菌株胞外物質(zhì)不能透過截留分子量為500 Da和100 Da的透析袋。這表明提取出來的抑藻物質(zhì)的分子量范圍最可能在500 Da～1000 Da之間。