蘇云金桿菌是一種對昆蟲有毒害作用的細菌,其殺蟲活性物質(zhì)主要是一類伴孢晶 體蛋白.伴孢晶體蛋白經(jīng)昆蟲腸液消化成毒性肽,并因此導(dǎo)致昆蟲死亡.自從培育轉(zhuǎn)基因 植物抗蟲棉成功后,研究人員又試圖將抗蟲基因?qū)胨炯毎,從而培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因抗蟲 水稻.研究人員從相關(guān)生物體內(nèi)提取出的部分物質(zhì)或結(jié)構(gòu)如下圖所示:圖1表示含有目的 基因(抗蟲基因)的DWA片段長度(bp為堿基對)和部分堿基序列,圖2表示作為運載體的 一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列.現(xiàn)有Msp I,BamH I,Mbo ISma I 4種限制性核酸內(nèi)切 酶,它們所識別的堿基序列和酶切位點(用“↓”表示)分別為C↓CGG.G↓ GATCC
n↓; GATC、CCC↓ GGG.請回答下列問題:
(1)若用限制酶Sma I完全切割圖1中所示DNA片段,則其產(chǎn)物有
種,長度分別為
.
(2)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因通過同種限制酶處理后進行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是
.
(3 )在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的水稻細胞,需配置相應(yīng)培養(yǎng)基,其中添加的碳源是
,目的是提供營養(yǎng)和
.另外,培養(yǎng)基中除了含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,一般還需要添加
(抗生素A/抗生素B),該培養(yǎng)基從用途上看屬于
培養(yǎng)基.
(4)在培養(yǎng)過程中,除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外,成功的另一個關(guān)鍵是操作過程必須保證無菌,鑷子等器械及培養(yǎng)基都可使用的滅菌方法是
.